①ChR2 由475 nm的蓝光激活,是阳离子选择性通道,允许阳离子(如Na+)大量内流,产生动作电位,使...
①ChR2 由475 nm的蓝光激活,是阳离子选择性通道,允许阳离子(如Na+)大量内流,产生动作电位,使神...
当与蓝光光敏蛋白ChR2共价结合的all-trans-retinal吸收了光子,促使ChR2分子构象发生变化,蛋白中间出现阳离子通道,Na离子和Ca离子的内流就可使细胞内电位上升,细胞去极化兴奋。 如果表达ChR2的是神经细胞,膜电位去极化可激活在轴突末端的电压门控钙通道,轴突末端的钙内流可促使神经细胞产生动作电位,释放神经递质囊泡。
AAV9 [CaMKIIa-ChR2-mCherry],≥1E+13 GC/mL,100ul ¥2,580 24h OT138-100 AAV9 [CaMKIIa-FLEX-ArchT-GFP],≥1E+13 GC/mL,100ul ¥2,580 24h OT171-100 AAV9 [GFAP-double floxed-EYFP]≥1E+13 GC/mL,100ul ¥2,580 24h OT172-100 ...
特别在近年来,随着光基因组学的快速发展,越来越多的实验室利用AAV病毒载体向特定神经环路的神经元导入光敏感通道ChR2(Channelrho- dopsin2)、NpHR(Halorhodopsin from Natronomonas pharaonis)等,控制神经元的兴奋或抑制状态,从而研究神经环路的结构、功能和调控机制。
ChR2是Channelrhodopsin的一种,属于视紫质蛋白(rhodopsins),是一类光控的离子通道,能通透Na+离子,还能通透K+,Ca2+,H+等阳离子,来源于模式生物莱茵衣藻。在这些单细胞藻类中,Channelrhodopsin是形成向光性的关键分子。当移植到其他生物体上以后,可以实现用光调控细胞兴奋性,胞内pH值,钙离子内流等生物学过程。ChR2对...
我是来自西安交通大学赖江华、王云鹏团队的殷芳圆。在该研究中分别采用AAV9-CaMKIIα-eNpHR3.0-mCherry(组织特异性启动子)和AAV9-CAG-ChR2-eGFP(广谱启动子)注射到小鼠基底外侧杏仁核,观察表达情况,结果如下图所示。 上图:AAV9-CaMKIIα-eNpHR3.0-mCherry注射到BLA抑制小鼠基底外侧杏仁核后,冠状脑切片mCherry(红色...
腺相关病毒AAV简介 腺相关病毒(Adeno-Associated Viral Vector,AAV)简介 腺相关病毒属微小病毒科(parvovirus),为无包膜的单链线状DNA病毒。AA V的基因组约4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由145个核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。1.安全性高 4.长时程表达稳定 AAV病毒特点 ...
(C) 通过AAV2-Retro进行逆行标记。(D) 逆行表达AAV-Cre重组酶,限制了特定回路中神经元的表达。在光遗传、化学遗传、钙成像中将光感基因(如ChR2,NaHR3.0,Arch等)、DREADD(如hM3Dq、hM4Di等)和GCaMP系列蛋白通过AAV进行递送,而且大部分研究通过Cre-LoxP系统进行调控,极大提高了区域特异性以及在时间上的控制。
光遗传学(Optogenetics)是一种能在自由活动的动物神经组织上精确、快速地引起特定细胞变化的技术。光遗传研究动物实验通常利用rAAV载体在动物体内导入表达光敏感的离子通道基因,如Channelrhodopsin-2(ChR2)、Halorhodopsin(NpHR)和Archaerhodopsin(Arch)等,并结合光纤植入和激光控制等方式,实现对神经细胞活动的精确控制。