①ChR2 由475 nm的蓝光激活，是阳离子选择性通道，允许阳离子（如Na+）大量内流，产生动作电位，使...
当与蓝光光敏蛋白ChR2共价结合的all-trans-retinal吸收了光子,促使ChR2分子构象发生变化,蛋白中间出现阳离子通道,Na离子和Ca离子的内流就可使细胞内电位上升,细胞去极化兴奋。 如果表达ChR2的是神经细胞,膜电位去极化可激活在轴突末端的电压门控钙通道,轴突末端的钙内流可促使神经细胞产生动作电位,释放神经递质囊泡。
①ChR2 由475 nm的蓝光激活，是阳离子选择性通道，允许阳离子（如Na+）大量内流，产生动作电位，使神...
AAV9 [CaMKIIa-ChR2-mCherry],≥1E+13 GC/mL,100ul ￥2,580 24h OT138-100 AAV9 [CaMKIIa-FLEX-ArchT-GFP],≥1E+13 GC/mL,100ul ￥2,580 24h OT171-100 AAV9 [GFAP-double floxed-EYFP]≥1E+13 GC/mL,100ul ￥2,580 24h OT172-100 ...
方法 以立体定位注射技术将腺相关病毒 AAV2/8-CaMKIIα-ChR2-mCherry 注射到 SD 雄性大鼠内侧前额叶,当病毒注射 3 ～4 周后,采用免疫荧光组织化学技术检测标记蛋白(mCherry)在谷氨酸能神经元(特异启动子 CaMKIIα)的表达情况;利用在体细胞外记录技术观测谷氨酸能神经元所表达的通道蛋白(ChR2)对不同光刺激频率的...
光遗传学(Optogenetics)是一种能在自由活动的动物神经组织上精确、快速地引起特定细胞变化的技术。光遗传研究动物实验通常利用rAAV载体在动物体内导入表达光敏感的离子通道基因,如Channelrhodopsin-2(ChR2)、Halorhodopsin(NpHR)和Archaerhodopsin(Arch)等,并结合光纤植入和激光控制等方式,实现对神经细胞活动的精确控制。
(C) 通过AAV2-Retro进行逆行标记。(D) 逆行表达AAV-Cre重组酶,限制了特定回路中神经元的表达。在光遗传、化学遗传、钙成像中将光感基因(如ChR2,NaHR3.0,Arch等)、DREADD(如hM3Dq、hM4Di等)和GCaMP系列蛋白通过AAV进行递送,而且大部分研究通过Cre-LoxP系统进行调控,极大提高了区域特异性以及在时间上的控制。
特别在近年来,随着光基因组学的快速发展,越来越多的实验室利用AAV病毒载体向特定神经环路的神经元导入光敏感通道ChR2(Channelrho- dopsin2)、NpHR(Halorhodopsin from Natronomonas pharaonis)等,控制神经元的兴奋或抑制状态,从而研究神经环路的结构、功能和调控机制。
[摘要] 目的 对腺相关病毒AAV2/8CaMKIIαChR2mCherry在大鼠内侧前额叶谷氨酸能神经 元中表达的组织学及通道功能予以鉴定。方法 以立体定位注射技术将腺相关病毒AAV2/8 CaMKIIαChR2mCherry注射到SD雄性大鼠内侧前额叶,当病毒注射3～4周后,采用免疫荧光组织化 学技术检测标记蛋白(mCherry)在谷氨酸能神经元(特异启...
AAV phSyn1-FSF-FLEX-ChR2(H134R)-EYFP-WPRE-bGHpA catalog : 65454 more info or order: Addgene product webpage citations: 1 Reference Madisen L, Garner A, Shimaoka D, Chuong A, Klapoetke N, Li L,et al. Transgenic mice for intersectional targeting of neural sensors and effectors with...