根据目的蛋白的分子量大小选择不同浓度的分离胶,8%、12%和15%三种浓度的分离胶就完全可以搞定日常蛋白的测定。一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。
研一新手速成WB 试剂配制 纯干货分享!不同分离胶的配方见图二,不同分离胶的根据所跑目的蛋白分子量进行选择,主要如下: 6%分离胶,适用75-200kDa 8%分离胶,适用50-150kDa 10%分离胶,适用23-120kDa 12%分离 - 科研日记于20230903发布在抖音,已经收获了96个喜欢,来抖音
答案 这个要看你蛋白大小的,个人习惯:蛋白如果100kD以上的话用8%,100-60用10%,60-40用12%,40-10用15%,分子克隆上面有的,每个浓度大概跑什么大小的蛋白质.相关推荐 1请教下跑蛋白胶胶的浓度根据什么定的,我们实验室用的是8%-12%的胶,但具体怎么选不知道 反馈 收藏 ...
内参的条带未能显现,但这并不成问题,因为您的目标蛋白已经成功上样。只要在切胶时格外留意,就可以顺利完成实验。此外,您所使用的8%的凝胶对于120多kDa的蛋白可能略显偏低。实际上,对于类似大小的蛋白,使用10%的凝胶更为合适。我曾经处理过200多kDa的蛋白,并且发现10%的凝胶同样能很好地分离这些...
假设跑胶跑到dye front刚刚出去就停下的话 15% 分离 5-30kDa 10% 分离 20-75 8% 分离 30-100 ...
8%的蛋白胶条带范围 蛋白胶条的含量为8%意味着该条的重量中有8%是蛋白质。这意味着在每100克蛋白胶条中,有8克是蛋白质。 然而,你提到了"带范围",这是一个不太清楚的术语,所以我不能完全明确理解你的意思。如果你可以提供更多细节,我将非常乐意帮助你。
对于分离胶的配置,通常情况下,200V电压可以跑45分钟左右。然而,如果要检测的蛋白分子量为100KD,可能需要调整电压以确保更好的分辨率。一般而言,较高分子量的蛋白可能需要较高的电压来提高分辨率,但具体电压需要根据实际情况调整。在进行转膜时,需要注意的细节包括将胶从板上小心取下,置于含有20%甲醇...
预制胶是中性pH,适用于跑酸性蛋白,其等电点小于7,电极方向和普通的SDS变性电泳相同即可。碱性蛋白建议用低pH凝胶系统。 电泳缓冲液建议新鲜配置,试剂纯度不够、反复使用或长期放置的缓冲液会降低电泳效果。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我要检测的蛋白是100KD,配置了8%的分离胶,该用多大的电压来跑分离胶?我用了120V,但是不到一个小时就跑完了,时间短对目的蛋白的分离有没有影响? 答案 Western Blotting Protocol1.细胞裂解只用于western的细胞可以直接用1%SDS/PBS裂解,要用于IP,co-ip之类的实验的蛋白用裂解液I&II的方法(这个我还没有涉及到)...
内参的那个线跑不出来,一样也能曝,因为你的蛋白已经在上面了,只要切胶的时候注意就可以了。另外,你120多的胶没必要用8%,用10%就够了,我200多的kda用10%都可以