4.一般到第7-10天，能获得完全分化的脂肪样细胞。5.分化效果检测。可以通过油红O染色来追踪向脂肪细胞样细胞的分化，以监测脂质积累，或通过监测脂肪细胞标志物（例如脂联素和 FABP4）的表达来追踪。注意：饱和油红O染色液不容易着色，染色前油红O染色液需要根据说明书进行稀释。如需了解更多产品详情，请前往阿拉丁官网查询。https://www.aladdin-e.com
对于诱导效果的检测有多种方式,其中油红O染色是检测脂肪细胞脂滴积累的经典方法,可用于直观评估细胞的脂肪化程度。油红O是一种脂溶性染料,能够特异性结合细胞内的中性脂质,形成红色的脂滴。可以在显微镜下观察脂滴的形成,当观察到脂滴数量和大小的增加则表明诱导分化成功。 另外也可以通过分子标志物检测的方式来判断诱导...
5.分化效果检测。可以通过油红O染色来追踪向脂肪细胞样细胞的分化,以监测脂质积累,或通过监测脂肪细胞标志物(例如脂联素和FABP4)的表达来追踪。 注意:饱和油红O染色液不容易着色,染色前油红O染色液需要根据说明书进行稀释。 如需了解更多产品详情,请前往阿拉丁官网查询。
3T3-L1 细胞内脂滴(lipid droplet, LD)染色方法主要有油红 O 染色 (Oil Red O)、尼罗红染色 (Nile Red)、BODIPY 脂滴类染料等。(小 M 之前已经单独介绍过相关的资料啦,有需要可以点击这里) 2. 半定量分析 将0.35 g Oil Red O 溶解在 100 mL 纯异丙醇中。3T3-L1 细胞在室温下用 3.7% 甲醛固定 1 h...
成熟阶段：更换常规培养基，持续培养至脂滴大量形成（通常需8-10天），油红O染色可见典型红色脂滴。研究显示，联合PPARγ激动剂（如罗格列酮）可显著提升分化效率，脂滴生成量较单一诱导剂增加超300%。三、科研应用价值 代谢疾病研究：作为肥胖、糖尿病等疾病的体外模型，用于解析脂质合成、胰岛素抵抗等机制。例如，研究...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 1.成脂诱导分化操作 1.1 接种干细胞 取对数生长期3T3-L1的细胞,按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿,于37℃,5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用 ...
通过油红O染色等方法观察细胞内脂肪滴的形成。 -注意事项 诱导液的成分和浓度可能需要根据实验需求进行优化。 确保无菌操作,避免细胞污染。 定期观察细胞状态,确保细胞健康。 3T3-L1细胞形态特点: 3T3-L1细胞是一种小鼠前脂肪细胞系,其形态特征包括扁平或多边形的细胞形状,细胞较大且通常呈现聚集或连片生长的状态。在...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 03 诱导分化过程 01 细胞长满以后,接触抑制2天(目的是让细胞退出生长周期); 图1. 细胞接触抑制 02 加入含有IBMX(使用浓度为0.5mM)、地塞米松(使用浓度为1μmol/L)、胰岛素(使用浓度为1-10μg/mL)的培养液培养2天; 图2. 加诱导培养...
染色：油红O储存液与超纯水按3:2稀释混匀，过滤，避光静置后酒红色且无沉淀，现配现用，2h内用完。用PBS磷酸缓冲液小心漂洗细胞三次，以2mL/孔（六孔板）的剂量加入4%多聚甲醛，室温固定40min，再用蒸馏水漂洗2次，每孔加入油红O工作液1mL，常温染色15min，蒸馏水漂洗至无残渣，蒸馏水漂洗后加入PBS镜下...
实验表明，上述化合物在2μM浓度的情况下不影响3T3-L1细胞的活性，也不激活细胞凋亡。诱导细胞分化14天后进行油红O染色，罗格列酮和吡格列酮可增加3T3-L1细胞系中的脂质积累（与对照组相比，分别增加了323.49%和166.13%），这是成熟脂肪细胞的一个标志。为了证实脂肪细胞完全分化，发现罗格列酮还增加了Pparγ和...