2.细胞预冷容易皱缩，也会增加脱壁的风险，每次换液前培养基应当充分预热；3.诱导液配制后应尽快使用，一般不超过3个月。3T3-L1诱导4d 3T3-L1诱导7d 3T3-L1诱导11d 3T3-L1成脂诱导—染色注意要点 1. 当观察到脂滴时，便可以进行油红O染色，如脂滴较小，可以延长诱导时间2-3d。诱导时间过长会导致脂滴脱落到...
DMEM 低糖基础培养基 175mL特级胎牛血清 20 mL成脂诱导液成脂诱导添加物 5mLIBMX 200μL油红 O 染色液 5mL其他成分0.1%明胶溶液 10mL产品简介3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色试剂盒包括成脂诱导培养体系所有成分以及鉴定所用的油红 O 染色液。本产品可用于 3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色...
在3T3-L1细胞的成脂诱导过程中换液需要轻柔,建议沿着培养器皿侧壁轻柔滴加诱导液,以防止细胞脱壁。 细胞在预冷时容易皱缩,增加脱壁的风险。每次换液前,培养基应当充分预热。 诱导液配制后应尽快使用,一般不超过3个月。📌 染色注意事项: 当观察到脂滴时,便可以进行油红O染色。如果脂滴较小,可以延长诱导时间2-...
使用油红O染色可以直接观察和定量分析3T3-L1细胞的成脂情况。将细胞用PBS洗涤,然后用4%的多聚庚烯醇(PVA)固定,用油红O染色液染色,再用70%乙醇洗涤,最后用去离子水冲洗干净即可。 油红O染色 Real-time PCR 使用Real-time PCR可以检测与成脂相关的基因表达情况,如PPARγ、C/EBPα、FABP4和adiponectin等。将细...
1)将3T3-L1前脂肪细胞接种于培养板,用含10%小牛血清的高糖DMEM培液在37℃、5%CO2培养; 2)待细胞长满至80-90%,融合2天(融合的意思是指让细胞接触抑制,就是长满后换液让其再长两天)后,加含终浓度为0.5 mmol/L IBMX(储存液浓度0.5 mmol/L)、终浓度为1 umol/L(储存液浓度为1 mg/ml (2.5 mmol/L)...
诱导细胞分化14天后进行油红O染色，罗格列酮和吡格列酮可增加3T3-L1细胞系中的脂质积累（与对照组相比，分别增加了323.49%和166.13%），这是成熟脂肪细胞的一个标志。为了证实脂肪细胞完全分化，发现罗格列酮还增加了Pparγ和NF-κB特异性蛋白的表达。图2. 分化14天后，对3T3-L1细胞进行染色测定 脂肪细胞外囊泡...
用油红O染色法鉴定细胞是否诱导成功。 小贴士 ● 从添加诱导剂开始到分化结束,通常需要8天。一般第6天脂滴就出来了,剩下2天就是脂滴积聚的过程。分化效果好的话,第4天脂滴就出来了; ● 3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,尽量用枪头贴壁逐滴加入,让液体慢慢流下,这样对细胞的冲击最小,否则极容易造成细胞...
实验表明,上述化合物在2μM浓度的情况下不影响3T3-L1细胞的活性,也不激活细胞凋亡。诱导细胞分化14天后进行油红O染色,罗格列酮和吡格列酮可增加3T3-L1细胞系中的脂质积累(与对照组相比,分别增加了323.49%和166.13%),这是成熟脂肪细胞的一个标志。为了证实脂肪细胞完全分化,发现罗格列酮还增加了Pparγ和NF-κB...
诱导完成后，经油红O染色，就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。1.成脂诱导分化操作1.1 接种干细胞取对数生长期3T3-L1的细胞，按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿，于37℃，5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液。NOTE：如细胞贴壁性较差，建议...
研究者可以利用3T3-L1分化成脂肪细胞评估新药对脂肪生成、脂肪代谢和胰岛素敏感的影响,通常诱导3T3-L1的分化成脂肪细胞的方式是鸡尾酒诱导法。 3T3-L1 细胞分化为成熟脂肪细胞 油红O染色测定不同的吡格列酮水平,不同脂滴的积累 *鸡尾酒诱导法实验方案材料准备: ...