用油红O染色法鉴定细胞是否诱导成功。 小贴士 ● 从添加诱导剂开始到分化结束,通常需要8天。一般第6天脂滴就出来了,剩下2天就是脂滴积聚的过程。分化效果好的话,第4天脂滴就出来了; ● 3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,尽量用枪头贴壁逐滴加入,让液体慢慢流下,这样对细胞的冲击最小,否则极容易造成细胞...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 1.成脂诱导分化操作 1.1 接种干细胞 取对数生长期3T3-L1的细胞,按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿,于37℃,5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用 ...
3T3-L1成脂诱导—染色注意要点 1. 当观察到脂滴时，便可以进行油红O染色，如脂滴较小，可以延长诱导时间2-3d。诱导时间过长会导致脂滴脱落到培养基中，随着换液损失脂滴，所以成脂诱导的染色时间点应以镜下观察为准，并不是诱导时间越长越好。2. 油红O染色液时过饱和溶液，使用1×PBS稀释后应该沉淀或离心处理...
DMEM 低糖基础培养基 175mL特级胎牛血清 20 mL成脂诱导液成脂诱导添加物 5mLIBMX 200μL油红 O 染色液 5mL其他成分0.1%明胶溶液 10mL产品简介3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色试剂盒包括成脂诱导培养体系所有成分以及鉴定所用的油红 O 染色液。本产品可用于 3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色...
用油红O染色法鉴定细胞是否诱导成功。 小贴士 ● 从添加诱导剂开始到分化结束,通常需要8天。一般第6天脂滴就出来了,剩下2天就是脂滴积聚的过程。分化效果好的话,第4天脂滴就出来了; ● 3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,尽量用枪头贴壁逐滴加入,让液体慢慢流下,这样对细胞的冲击最小,否则极容易造成细胞...
在3T3-L1细胞的成脂诱导过程中换液需要轻柔,建议沿着培养器皿侧壁轻柔滴加诱导液,以防止细胞脱壁。 细胞在预冷时容易皱缩,增加脱壁的风险。每次换液前,培养基应当充分预热。 诱导液配制后应尽快使用,一般不超过3个月。📌 染色注意事项: 当观察到脂滴时,便可以进行油红O染色。如果脂滴较小,可以延长诱导时间2...
油红O染色 1)先小心轻缓倒去培养夜。 2)用pbs轻缓漂洗。 3)加10%多聚甲醛固定30min。 4)用60%异丙醇洗涤 5)油红O母液现用现配:称取0.5g油红O粉末,以异丙醇溶解并定容至100 ml,4℃避光贮存。稀释油红O母液,油红:去离子水=3:2,滤纸过滤,室温放置10 min(除去一些杂质,染色结果更清晰)。 6)油红...
诱导细胞分化14天后进行油红O染色，罗格列酮和吡格列酮可增加3T3-L1细胞系中的脂质积累（与对照组相比，分别增加了323.49%和166.13%），这是成熟脂肪细胞的一个标志。为了证实脂肪细胞完全分化，发现罗格列酮还增加了Pparγ和NF-κB特异性蛋白的表达。图2. 分化14天后，对3T3-L1细胞进行染色测定 脂肪细胞外囊泡...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 1.成脂诱导分化操作 1.1 接种干细胞 取对数生长期3T3-L1的细胞,按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿,于37℃,5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用 ...
研究者可以利用3T3-L1分化成脂肪细胞评估新药对脂肪生成、脂肪代谢和胰岛素敏感的影响,通常诱导3T3-L1的分化成脂肪细胞的方式是鸡尾酒诱导法。 3T3-L1 细胞分化为成熟脂肪细胞 油红O染色测定不同的吡格列酮水平,不同脂滴的积累 *鸡尾酒诱导法实验方案材料准备: ...