前脂肪细胞是一类同时具有增殖和分化为成熟脂肪细胞能力的前体细胞,此种前体细胞在不同的生长因子、激素等物质的作用下,经历有丝分裂克隆期、生长停滞期、进一步的克隆期、终末分化四个阶段,细胞本身的成纤维状态发生改变,通过胞质内甘油三脂聚集形成成熟脂肪细胞。诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂...
诱导完成后，经油红O染色，就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。1.成脂诱导分化操作1.1 接种干细胞取对数生长期3T3-L1的细胞，按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿，于37℃，5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%，弃掉上清，加入成脂诱导分化培养基诱导液。NOTE：如细胞贴壁性较差，建议...
DMEM 低糖基础培养基 175mL特级胎牛血清 20 mL成脂诱导液成脂诱导添加物 5mLIBMX 200μL油红 O 染色液 5mL其他成分0.1%明胶溶液 10mL产品简介3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色试剂盒包括成脂诱导培养体系所有成分以及鉴定所用的油红 O 染色液。本产品可用于 3T3-L1 细胞成脂诱导分化与染色...
3T3-L1成脂诱导—染色注意要点 1. 当观察到脂滴时，便可以进行油红O染色，如脂滴较小，可以延长诱导时间2-3d。诱导时间过长会导致脂滴脱落到培养基中，随着换液损失脂滴，所以成脂诱导的染色时间点应以镜下观察为准，并不是诱导时间越长越好。2. 油红O染色液时过饱和溶液，使用1×PBS稀释后应该沉淀或离心处理...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 03诱导分化过程 01 细胞长满以后,接触抑制2天(目的是让细胞退出生长周期); 图1. 细胞接触抑制 02 加入含有IBMX(使用浓度为0.5mM)、地塞米松(使用浓度为1μmol/L)、胰岛素(使用浓度为1-10μg/mL)的培养液培养2天;...
实验表明，上述化合物在2μM浓度的情况下不影响3T3-L1细胞的活性，也不激活细胞凋亡。诱导细胞分化14天后进行油红O染色，罗格列酮和吡格列酮可增加3T3-L1细胞系中的脂质积累（与对照组相比，分别增加了323.49%和166.13%），这是成熟脂肪细胞的一个标志。为了证实脂肪细胞完全分化，发现罗格列酮还增加了Pparγ和...
油红O染色 1)先小心轻缓倒去培养夜。 2)用pbs轻缓漂洗。 3)加10%多聚甲醛固定30min。 4)用60%异丙醇洗涤 5)油红O母液现用现配:称取0.5g油红O粉末,以异丙醇溶解并定容至100 ml,4℃避光贮存。稀释油红O母液,油红:去离子水=3:2,滤纸过滤,室温放置10 min(除去一些杂质,染色结果更清晰)。 6)油红...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 1.成脂诱导分化操作 1.1 接种干细胞 取对数生长期3T3-L1的细胞,按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿,于37℃,5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用 ...
诱导细胞分化14天后进行油红O染色,罗格列酮和吡格列酮可增加3T3-L1细胞系中的脂质积累(与对照组相比,分别增加了323.49%和166.13%),这是成熟脂肪细胞的一个标志。为了证实脂肪细胞完全分化,发现罗格列酮还增加了Pparγ和NF-κB特异性蛋白的表达。 图2. 分化14天后,对3T3-L1细胞进行染色测定...
诱导完成后,经油红O染色,就可以在镜下观察到甘油三脂脂肪滴的生成。 1.成脂诱导分化操作 1.1 接种干细胞 取对数生长期3T3-L1的细胞,按照2.0×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至培养器皿,于37℃,5%CO₂培养环境下培养至汇合度90%,弃掉上清,加入成脂诱导分化培养基诱导液。 NOTE:如细胞贴壁性较差,建议使用 ...