2–∆∆Ct 是一种计算实时荧光定量PCR(qPCR)时候计算样品中某个基因的相对表达量的方法。该法由Kenneth Livak和Thomas Schmittgen于2001年设计,已经被广泛使用。 Ct值代表了样品的循环阈值,这是在跑荧光定量PCR的时候,机器反馈给你的一个数值。真正的含义是PCR过程中产物扩增出现的荧光信号达到了设定的阈值之后,...
Livak法（也称为相对定量法或∆∆Ct法）是一种常用的实时荧光定量PCR（qPCR）数据分析方法，用于分析...
qPCR的相对定量计算方式，即2–∆∆Ct方法，由Kenneth Livak和Thomas Schmittgen于2001年提出并广泛应用。此方法在实时荧光定量PCR（qPCR）实验中，用于计算样品中特定基因相对于参考基因的相对表达量。荧光定量PCR实验中，仪器会根据扩增产物的荧光信号达到设定阈值的循环数来记录Ct值。Ct值的高低...
以Pearson相关性分析法分析AAD患者PBMC中S1P、S1PR2表达与MMP-9的相关性。以Logistic回归分析法分析AAD预后的影响因素:以AAD预后是否良好(预后良好=0,预后不良=1)为因变量,以冠心病(否=0,是=1)、S1P(连续变量)、S1PR2(连续变量)、...
PCR反应程序:95 ℃ 30 s;95 ℃ 5 s,60 ℃30s,45个循环。mRNA的相对转录量采用2-∆∆Ct方法计算,并以β⁃actin为内参基因。 1.5免疫组织化学检测 选取小鼠感染后第5 d试验的肺组织进行免疫组化。组织按常规方法制片,厚度4...
1.2.6 数据分析 在每个处理时间点,RNAi 试验中 以 Nuclease-free water 组为对照,2-TD 胁迫试验中以 0 mg/g 组为对照,用 2-∆∆Ct 法计算 FoxAl 和 CYP6B6 的相对表达量.运用 Prism 8.0 软件进行统计分析 : RNAi 试验,在每个时间点进行 t 检验(Student's t test);2-TD 胁迫试验,在每个时间点...
( real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)分析 RT-PCR 检测风险预测基因在模型组结肠黏膜 组织与正常组结肠黏膜组织中的表达水平.使用 TRIzol 试剂提取总 RNA 进行逆转录;使用 TBgreen (RR420)染料按照 10 μL 体系进行循环扩增,引物 序列见表 1.通过 2−∆∆Ct 方法测定基因相对表达量...
1.指数扩增、模板量与Ct值的关系 理想情况下，qPCR中的基因经过一定的循环数被指数扩增而积累，扩增循环...
以鳜核糖体蛋白L13a (Ribosomal protein L13a, rpl13a)作为内参基因, 采用2–∆∆Ct方法计算相对基因 表达水平[23].单样本t检验(One sample t-test)用来 检测数据分布的正态性; 独立样本t检验(Indepen- dent sample t-test)用来分析2个样本之间的差异; 单 因素方差分析(One-way ANOVA)用来检验多个样 ...