缓冲液配方0.01M PBS,pH7.4,含0.05%普鲁克林-300,50%甘油。 项目名称白细胞介素13受体α1 免疫原RPB641Mu01重组白细胞介素13受体α1(IL13Ra1) 图像编号3 种反应性小鼠 免疫原IL13Ra1序列(Glu28~Cys171) 应用WB,IHC 替代名称CD213A1;CD213-A1;IL13R-A1;IL13-RA1;IL13R-A;NR4;CT19;癌症/睾丸抗原19...
缓冲液配方0.01M PBS,pH7.4,含0.05%普鲁克林-300,50%甘油。 项目名称Dickkopf相关蛋白4 免疫原RPQ088Hu01重组Dickkopf相关蛋白4(DKK4) 图像号2 种反应性人 免疫原DKK4序列(Gln107~His212) 应用WB,IHC 克隆性兔多克隆 浓度500ug/ml 替代名称- 适用二级抗体SAA544Rb59,SAA544Rb58,SAA544Rb57、SAA544Rb18...
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.0-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
对于特定的细胞,CCCP的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。 3. 对于悬浮细胞 取10～60万细胞,重悬于0.5mL细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。 加入0.5mL JC-10染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。 在孵育期间,按照每1mL JC-10染色缓冲液(5×)加入4mL...
B、植物细胞:用PH7.2-7.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
起始浓度为1*10(6)至1*10(7)细胞/毫升;2)解冻过程中的问题,推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养;3)对冷冻液过敏,推荐的解决方案:A.完全或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除...
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的 终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。 1、样品前处理: a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培...
全部试验和对照小鼠经尾静脉注射0.25 mL 含 ³H- 胸腺嘧啶脱氧核苷740 kBq(20μCi)放射单位的磷酸盐缓冲液(PBS),对125I-碘脱氧尿苷则注射0.25mL含74kBq(2μCi)放射单位的PBS,或注射0.25mL含10-⁵mol/L荧光氟脱氧尿苷的PBS。见参考文献[33]。 其他不需要放射性标记的替代步骤是可行的,宜予以考虑[例如三...
简言之,先用1∶25稀释抗IL-4单抗包被聚苯乙烯微孔板,每孔100μl,湿盒内4℃过夜,以含0.05%(体积分数)吐温-20和10 g·L-1牛血清白蛋白的pH7.5 PBS洗涤3次待用。将标准品IL-4以PBS蛋白缓冲液作连续1∶1稀释,使成5×104、1×104、5×103、2.5×103、1.25×103、5×102和2.5×102u·L-1。待检细胞...