10*pbs缓冲液稀释为1*Pbs:裂解细胞一般用1%的TritonX-100那样的话5毫升的10倍的PBS+490毫升的蒸馏水。加水定容至1升,在1.034x10(5),高压蒸汽灭菌20分钟。室温保存。一般用于实验室中的PBS缓冲液都是这样配制,而不用摩尔分数表示。它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白...
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。 1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份...
对于六孔板的一个孔,吸除培养液,根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入1mL细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。加入1mL JC-10染色工作液,充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。 在孵育期间,按照每1mL JC-10染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-10染色缓冲液...
在pH=10含有酒石酸盐(A)的氨性缓冲液中, 用0.020 mol/L EDTA 滴定同浓度的Pb2+。已知lgK(PbY)=18.0, 化学计量点时lgaY(H)=0.5, lgaPb(OH)=2.7, lgaPb(A)=2.8 (Pb2+与A 形成1:1络合物)。则化学计量点时 lgK'(PbY)=___。(注:1、保留一位有效数字;2、答案的字体为Times New Roman)如何...
每组10只大鼠,于致炎后d 14～d 22 ip IL-10或地塞米松,AA对照组ip 0.1% BSA用PBS(pH 7.2)配制。每日上午8:00～9:00给药,给药容积均为0.2 ml·鼠-1,每天1次,连续9 d。在d 0、d 14、d 17、d19、d 21、d 24、d 28下午2:00～3:00测定非致炎侧足肿胀度,每周称体重1次。致炎后d28处死大鼠...
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培...
●组织标本: 切割标本后,称取重量.加入一定量的 PBS,缓冲液中可加入 1 μg/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin(抑肽酶).用手工或匀浆器将标本匀浆充分. 离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分).仔细收集匀浆上清.-20°C 或者-80°C 冷冻保存. 四,样本收集注意事项: 1. 每个标本量收集体积=约 60ul...
●组织标本: 切割标本后,称取重量.加入一定量的 PBS,缓冲液中可加入 1 μg/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin(抑肽酶).用手工或匀浆器将标本 匀浆充分.离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分).仔细收集匀浆上清.-20°C 或者-80°C 冷冻保存. 四,样本收集注意事项: 1. 每个标本量收集体积=约 60ul...
●组织标本: 切割标本后,称取重量.加入一定量的 PBS,缓冲液中可加入 1 μg/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin(抑肽酶).用手工或匀浆器将标本匀浆充分. 离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分).仔细收集匀浆上清.-20°C 或者-80°C 冷冻保存. 四,样本收集注意事项: 1. 每个标本量收集体积=约 60ul...