对于六孔板的一个孔,吸除培养液,根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入1mL细胞培养液。细胞培养液中可以含有血清和酚红。加入1mL JC-10染色工作液,充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。 在孵育期间,按照每1mL JC-10染色缓冲液(5×)加入4mL蒸馏水的比例,配制适量的JC-10染色缓冲液...
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。 细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培...
lTissue Homogenates100mg tissue was rinsed with 1X PBS, homogenized in 1 mL of 1X PBS and stored overnight at -20° C. After two freeze-thaw cycles were performed to break the cell membranes, the homogenates were centrifuged for 5 minutes at 5000 x g,2 - 8°C. The supernate was a...
全部试验和对照小鼠经尾静脉注射0.25 mL 含 ³H- 胸腺嘧啶脱氧核苷740 kBq(20μCi)放射单位的磷酸盐缓冲液(PBS),对125I-碘脱氧尿苷则注射0.25mL含74kBq(2μCi)放射单位的PBS,或注射0.25mL含10-⁵mol/L荧光氟脱氧尿苷的PBS。见参考文献[33]。 其他不需要放射性标记的替代步骤是可行的,宜予以考虑[例如三...
●组织标本: 切割标本后,称取重量.加入一定量的 PBS,缓冲液中可加入 1 μg/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin(抑肽酶).用手工或匀浆器将标本 匀浆充分.离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分).仔细收集匀浆上清.-20°C 或者-80°C 冷冻保存. 四,样本收集注意事项: 1. 每个标本量收集体积=约 60ul...
每组10只大鼠,于致炎后d 14～d 22 ip IL-10或地塞米松,AA对照组ip 0.1% BSA用PBS(pH 7.2)配制。每日上午8:00～9:00给药,给药容积均为0.2 ml·鼠-1,每天1次,连续9 d。在d 0、d 14、d 17、d19、d 21、d 24、d 28下午2:00～3:00测定非致炎侧足肿胀度,每周称体重1次。致炎后d28处死大鼠...
原。按照试剂盒说明配制 TdT 缓冲液,并将其加入 切片中。用 Hoechst 33258 染色 10 min,然后使用荧 光显微镜采集图像。每个样本在 200倍视野下随机 采集3 张图片,随后利用 ImageJ 软件读取每张图片 总细胞数和 TUNEL 阳细胞数并取平均值,随后计算 每个样本 TUNEL 阳性细胞数与总细胞数之比,将得 出的比值进行...
●组织标本: 切割标本后,称取重量.加入一定量的 PBS,缓冲液中可加入 1 μg/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin(抑肽酶).用手工或匀浆器将标本匀浆充分. 离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分).仔细收集匀浆上清.-20°C 或者-80°C 冷冻保存. 四,样本收集注意事项: 1. 每个标本量收集体积=约 60ul...
全部试验和对照小鼠经尾静脉注射0.25 mL 含 ³H- 胸腺嘧啶脱氧核苷740 kBq(20μCi)放射单位的磷酸盐缓冲液(PBS),对125I-碘脱氧尿苷则注射0.25mL含74kBq(2μCi)放射单位的PBS,或注射0.25mL含10-⁵mol/L荧光氟脱氧尿苷的PBS。见参考文献[33]。