将 20 μL 2 mM EthD-I 和 5 μL 4 mM Calcein AM 与 10 mL PBS 或其他无血清缓冲液或培养基混合,涡旋混匀。上述工作液可直接用于细胞染色。 注: Calcein AM 的水溶液易水解,应当天用完。 Calcein AM 和 EthD-I 的浓度选择依据所用细胞类型不同而有所区别,推荐浓度范围为 0.1~10 μM。 2. 准备...
中火 8 min,停火 8 min,然后中低火 7 min,此 过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干片.自然冷却后 将玻片置于 PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次,每次 5 min.阻断内源性过氧化物酶:切片放入 3% 过氧化氢溶液,室温避光孵育 25 min,将玻片置于 PBS (PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5 min....
√ 用PBS缓冲液+0.1%Tween洗涤3次后,在搅拌下,膜与10ml用PBS缓冲液+0.1%Tween+2%脱脂奶1/2000稀释的过氧化物酶偶联的抗小鼠IgG偶联物室温温育1小时。 √ 用PBS缓冲液+0.1%Tween洗涤3次后,膜浸泡于ECL显色试剂中,之后暴露于胶片4分钟。 图10是获得的照片的扫描图像,如该图所示,杂交瘤3D4上清液产生的抗体只...
间接ELISA的方法对抗血清的效价进行检测,具体操作步骤如下:(1)包被:进行ZYP1蛋白的稀释时,使用0.05 M pH调至9.6的碳酸盐缓冲 液,经过稀释的含量为10 μg/l。在96孔板的孔中加200 μl稀释的蛋白,4 ℃条件 下反应过夜。次日,用洗涤缓冲液清洗3×5 min。(2)封闭:加100 μl脱脂奶粉(5%PBS)在4 ℃封闭过夜...
结论:血管内膜损伤后,内皮细胞再生对内膜进行修复,然而内膜的过度增 生也造成了管腔的狭窄;以免疫组化法检测,光学显微镜见胞浆及胞膜上棕黄色颗 粒,即为细胞间黏附分子.1、血管细胞黏附分子.1,损伤术后7天和14天表达最高, 明显高于假手术侧,细胞间黏附分子.1、血管细胞黏附分子.1可作为区别J下常内皮 细胞和...
的pbs溶液稀释至1 × pbs缓冲液使用。封闭液:称取5g的奶粉至pbs中,封闭液需现配现用。终止液(1mol/lh2so4):取109ml 98%的浓h2so4缓慢滴加至2000mlddh2o中。tmb 37℃显色10min,置于摇床中(120rpm),100ul/孔; [0075] 实验步骤:种2e5/孔细胞chos-cld18.2-16-2于u型板,冰pbs洗一遍,1200rpm,离心3m...
结论:血管内膜损伤后,内皮细胞再生对内膜进行修复,然而内膜的过度增 生也造成了管腔的狭窄;以免疫组化法检测,光学显微镜见胞浆及胞膜上棕黄色颗 粒,即为细胞间黏附分子.1、血管细胞黏附分子.1,损伤术后7天和14天表达最高, 明显高于假手术侧,细胞间黏附分子.1、血管细胞黏附分子.1可作为区别J下常内皮 细胞和...