1、磷酸缓冲液(PBS,1L):8g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4,3.628g Na2HPO4·12H2O,双蒸水定容至1L; 2、饱和氯化钠溶液(5M NaCl,1L):292.5g NaCl,双蒸水溶解定容至1L; 3、1M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0):30.3g Tris base溶于200ml双蒸水中,盐酸调节pH值至8.0,定容至250ml; 4、0.5M EDTA(PH 8.0):36...
10*pbs缓冲液稀释为1*Pbs:裂解细胞一般用1%的TritonX-100那样的话5毫升的10倍的PBS+490毫升的蒸馏水。加水定容至1升,在1.034x10(5),高压蒸汽灭菌20分钟。室温保存。一般用于实验室中的PBS缓冲液都是这样配制,而不用摩尔分数表示。它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白...
pbs缓冲液:称取nacl 8.00g、kc1 0.20g、na2hpo4 · 12h202.9g、kh2po4 0.2g至800ml ddh2o中溶解,充分溶解后定容至1l,调节ph至7.4,高温灭菌备用。或购买商品化10 × 、20 × 的pbs溶液稀释至1 × pbs缓冲液使用。封闭液:称取5g的奶粉至pbs中,封闭液需现配现用。终止液(1mol/lh2so4):取109ml 98%...
5’一CTAGTGCAGAATTCAGCTGTGGTA.3’ PCNA上海生工生物技术有限公司 扩增片段:133bp sense: Antisense: Md卜l 北京六合通经贸有限公司 扩增片段:157bp ATCATTGCAATA sense: 5’.CCC GCAGG.3’ Antisense:5’.GTTCAAACTTCTGCTCCTCA.3’ 1-3溶液配制 室温存放 l×PBS缓冲液:KCl O.29;KH2P040.29;NaCl89;Na2...
工作液可直接于细胞染色。 3. 用 1×PBS 充分清洗细胞 2~3 次。 4. 用 0.5 mL 染色工作液悬浮细胞,控制细胞密度为 1-5×105/mL。 注: 推荐准备两管额外的细胞样品, 每管只加入一种染料(Calcein AM 和 EthD-I),用于流式单染的补偿调节;另准备一管 仅含缓冲液(该缓冲液与配制 Calcein AM 及 EthD...
6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 实验材料与试剂配制: 1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。 2. 缓冲液使用:加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。 混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者...
(1)将待交联的蛋白(浓度≥1mg/mL)对交联反应液透析三次4℃,至pH=9.0。交联反应液配制方法:7.56g NaHCO3,1.06g Na2CO3,7.36g NaCl,加水定容至1 L。 (2)将FITC溶于DMSO中,浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。 (3)按P:F(蛋白质:FITC)=1mg:150μg 的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中,...
给药结束后,PBS 洗涤 1 次,用 4%多聚甲醛固 定细胞 30 min,再用 PBS 洗涤 1 次;用含 0.3% Triton X-100 的 PBS 室温孵育 5 min,按说明书配制 TUNEL 检测液,37 ℃避光孵育 60 min.清洗后与 DAPI 共染 5 min.最后覆盖载玻片,用 50%甘油封片.在倒 置荧光显微镜下观察染色结果,采用 Image J ...
悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次; 3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。 4. 细胞洗涤后,转至新...
吸去PFA后,用95%乙醇溶液洗胚胎2次,彻底吸干后,添加1ml80%乙醇/20%冰醋酸配制的0.1%的阿尔新蓝溶液,取上清染液,染色过夜。 3)洗脱 用60%乙醇/40%PBS溶液冲洗胚胎1次后,换成40%乙醇/60%PBS再冲洗1次,再更换成20%乙醇/80%PBS冲洗一次,最后用PBS缓冲液冲洗2次。 4)清理 吸干PBS溶液后,使用溶解于饱和四...