固定的细胞在封闭缓冲液(含有3%山羊血清,0.5%BSA的PBS)中封闭,在室温下与DAPI(0.5μg/ml)以及1∶2000稀释的Alexa488-山羊抗小鼠二级抗体(Molecular Probes)一起温育45分钟。用PBS洗涤细胞,用ProLong Antifade试剂盒(Molecular Probes)将细胞固定在载玻片上,并用BioRad Radiance 2100共聚焦显微镜系统(60×物镜)检测。
1.5 Western blot RIPA缓冲液裂解细胞提取总蛋白。RIPA缓冲液的配制及其含有的蛋白酶和磷酸酶抑制剂配方参看我们以前的描述[7]。BCA测定蛋白浓度后,以50 μg总蛋白量上样后SDS-PAGE电泳,然后用湿法转膜转印至醋酸纤维素膜,5%脱脂牛奶室温封闭1 h,一抗4℃孵育过夜,洗膜,加二抗,室温孵育1 h,洗膜,ECL发光,显影,...
建议将抑制剂先以DMSO做梯度稀释,再将经过稀释的抑制剂加入缓冲液或细胞培养基。有些抑制剂甚至只有在其工作浓度下才能溶于水相。 比如细胞实验中希望终浓度为 1 μM 的话,可以把 10 mM 的 DMSO 母液用 DMSO 稀释到 1 mM,再吸 2 μL 加入到 2 mL 的生理盐水/PBS/细胞培液,终浓度即为 1 μM。 为...
质量浓度为 11.1g·L-1CaCl2 (M=111.0 g·mol-1)溶液的渗透浓度是 ( ) A.100mmol ·L-1 B.200mmol ·L-1 C.300mmol ·L-1 D.400mmol ·L-1 三、填充题: 1.10.0 g·L-1NaHCO3 (Mr=84)溶液的渗透浓度为___mol·L-1。37℃ 时的渗透压为___ KPa,红细胞在该溶液中会产生___现象。
计算题 4. 1 混合后发生反应: HAc + NaOH = NaAC + H2O 反应后剩余 HAc 及生成 NaAC 的浓度为: c(HAc) = 则混合溶液应为缓冲液,按公式计算: =1.7×10-3(mol·dm-3)= 0.8% 4. 3 设需 HAc 溶液和 NaOH 溶液各取 V1cm-3 和 V2 cm-3 则: 所以 V1 + V2 = 450 联立后解得:V1 =305 ...
(transientreceptorpotential subfamily member 1,TRPVl)是近年来发现的存在于细胞膜或胞内细胞器膜上的一类与多 种感受功能有关的非选择性阳离子通道蛋白,该通道可被多种理化因素激活,主 要有辣椒素、大于43C的热刺激和质子等,且被激活时主要引起Ca2+的大量内流, 以胞内Ca2+浓度增高的形式调节着相应的生理功能...
[2] 胃癌细胞在一定的缺氧条件下,其新生血管和能量供应与缺氧环境有着密切的关系;缺氧的环境是胃癌细胞 增殖的关键因素之一。关键词: HIF-1a /VEGF /Glut1 /CoCl2/胃肿瘤 Expression of HIF-1a、VEGF and Glut1 in GastricCancer and Their SignificanceAbstractObjectiveTo investigate the expression of HIF-1a,...
建议将抑制剂先以DMSO做梯度稀释,再将经过稀释的抑制剂加入缓冲液或细胞培养基。有些抑制剂甚至只有在其工作浓度下才能溶于水相。 比如细胞实验中希望终浓度为 1 μM 的话,可以把 10 mM 的 DMSO 母液用 DMSO 稀释到 1 mM,再吸 2 μL 加入到 2 mL 的生理盐水/PBS/细胞培液,终浓度即为 1 μM。 为...
3、完成并配平下列反应方程式 (1)Na 2S+O 2+H 2O (2)PbS+H 2O 2 (3)H 2SO 4(稀)+BaO 2 (4)I 2+NaS 2O 3 (5)Na 2S 2+Sb 2S 3 (6)Cr 3+ +S 2O 82+ +H 2O Ag+ 4、通过计算说明下列问题:(1)往Cu 2+ 浓度为0.1mo1·L -1 溶液中通H 2S 气体达饱和,CuS 是否沉淀完全?