逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)是一种分子技术。聚合酶联式反应(PCR)是一种实验方法,用于扩增DNA特定区域,以便在医学研究中进行分析和诊断。RT-PCR使用mRNA作为起始模板,是PCR的改良版。其中使用一种称为逆转录酶的酶。这种酶有助于将RNA序列转化为其互补DNA序列。RT-PCR就是基于逆转录的原理。它是一...
与相对和竞争性定量方法相比,比较 RT-PCR 被认为是更方便使用的方法,因为它不需要研究者进行初步实验;在相对 RT-PCR 中,必须预先确定 mRNA 的指数扩增范围,而在竞争性 RT-PCR 中,必须合成合成的竞争 RNA。 Real-time RT-PCR 在过去几年中,新型荧光 DNA 标记技术的出现使 PCR 产物的实时分析和检测成为可能,...
实时PCR(RT-PCR)是一种使用荧光染料或探针(实验室通常称为引物)技术对样品中存在的核酸进行定量的技术或实现靶基因/序列的扩增。RT-PCR足以扩增目标或模板DNA (cDNA是其中一种),也就是说,它可以在PCR仪器(热循环仪器)复制DNA。它使我们能够研究目标序列或基因,因此一直是遗传学中的一项关键技术。 (图3 RT-PCR...
【分子生物学】17.6 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 生命中国· 2022-5-10 1674021:40 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 我认识路呀· 2022-12-14 5869220:21 【实验方法】 科研基本功|逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)操作方法全过程教学视频 DLab实验室· 2021-8-4 22.2万19603:21 【三分钟理解】 PCR - ...
逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
逆转录PCR(RT—PCR)是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT—PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。下列关于RT—PCR的叙述,正确的是( ) A. RT—PCR所用的酶包括逆转录酶和热稳定DNA聚合酶 B. RT—PCR所用的两引物序列不同,两者间可互补配对 C. RT—PCR过程...
(4)RT-PCR过程中主要借助对温度的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行。(5)利用RT-PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度),便于检测。
逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）是一种实验室技术，能够将RNA逆转录为DNA（互补DNA或cDNA），并利用聚合酶链反应（PCR）扩增特定的DNA目标。此技术主要用于测量特定RNA的量。实时PCR或定量PCR（qPCR）通过荧光监测扩增反应来实现，联合RT-PCR和qPCR通常用于基因表达分析，在研究和临床环境中对病毒RNA进行定量...
(3)PCR 程序:42℃ 2min。 2.配制第一链 cDNA 合成反应液 (1)在 RNase-free 离心管中按照下表配制 20mμL 体系(以 Takara 试剂盒 Prime Script™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time),SYBR Green Ⅰ法为例)。 试剂 步骤 1 的反应液 Prime Script RT Enzyme Mix I RT Primer Mi ...