逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR) 的原理是:提取组织或细胞中的总 RNA,以其中的 mRNA 作为模板,采用 Oligo(dT) 或随机引物利用逆转录酶反转录成 cDNA。再以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增,而获得目的 基因或检测基因表达。RT-PCR 使 RNA 检测的灵敏性提高了几个数量...
逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)是一种分子技术。聚合酶联式反应(PCR)是一种实验方法,用于扩增DNA特定区域,以便在医学研究中进行分析和诊断。RT-PCR使用mRNA作为起始模板,是PCR的改良版。其中使用一种称为逆转录酶的酶。这种酶有助于将RNA序列转化为其互补DNA序列。RT-PCR就是基于逆转录的原理。它是一...
与相对和竞争性定量方法相比,比较 RT-PCR 被认为是更方便使用的方法,因为它不需要研究者进行初步实验;在相对 RT-PCR 中,必须预先确定 mRNA 的指数扩增范围,而在竞争性 RT-PCR 中,必须合成合成的竞争 RNA。 Real-time RT-PCR 在过去几年中,新型荧光 DNA 标记技术的出现使 PCR 产物的实时分析和检测成为可能,...
【分子生物学】17.7 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR) 生命中国· 2022-5-11 8284003:52 RT-PCR(逆转录PCR)操作和原理 生物使容快乐· 2023-6-29 3万2002:10 中文配音讲解PCR(聚合酶链式反应) TrafalgaYu· 2022-4-3 1.1万4213:22 【基因工程】PCR 竟然这么简单!|聚合酶链式反应 原理 条件 过程 ...
逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
逆转录PCR(RT—PCR)是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT—PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。下
(4)RT-PCR过程中主要借助对温度的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行。(5)利用RT-PCR技术获取的目的基因能在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是增加了待测RNA逆转录产生的DNA的数量(或浓度),便于检测。
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的转录产物;(2)获取目的基因;(3)合成cDNA探针;(4)构建RNA高效转录系统。 实验原理: 逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作...
1 背景知识介绍 1.1 互补DNA(Complementary DNA,cDNA) cDNA是一种由mRNA逆转录而来的DNA(有单/双链两种情况),通常用于研究基因表达和克隆。cDNA是单链还是双链得根据实际情况,例如RT-PCR, 3'或5' R…