如何进行质粒小量制备(实验操作)无非一梦 立即播放 打开App,流畅又高清100+个相关视频 更多137 -- 2:59 App Plasmid Isolation质粒的分离制备 6921 -- 6:38 App DNA提取和设置PCR反应(实验操作) 1082 -- 6:14 App 划痕实验Scratch Assay(实验操作) 915 1 4:19 App 【comet assay】实验操作 2A: ...
二、质粒DNA保存 1. 短时间保存可将选择培养基上的菌落保存于℃;长时间保存可将菌液-70℃保存于甘油或DMSO溶液中。 2. 从保存在选择平板上挑取菌落进行培养,并通过限制酶分析检测质粒。 3. 溶于TE缓冲液的质粒DNA可在4℃短时间保存,并可于-20℃或-70℃长时间保存。Protocol...
实验方法原理 当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的质量要比碱裂解法差。 实验...
王禄德带着昭昭回了,闵征眼见着他们的身影越来越小,才去找了晏缜。晏缜正给自己的马喂着草,这匹马浑身雪白,毛色鲜亮,膘肥体壮,千里绝群,是关外名驹,数次跟着晏缜上战场厮杀。晏缜爱惜它,平日里都是他亲自喂养。闵征见晏缜的表情也没什么不对,心里有些怀疑自己的眼光了。那昭昭,虽说年纪小些,不怎么会伺...
AxyPrep 质粒小量制备试剂盒采用快速、高效的方法,通过小量制备管的形式纯化质粒DNA。每管适合从多至4 ml LB细菌培养物或2 ml肉汤培养物中提取质粒DNA。整个过程不超过20 min,纯化后的质粒DNA可直接适用于测序、限制性酶切、体外转录与翻译、构建分子文库、细菌转化等。
当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。碱裂解法是最常用的小量制备质粒DNA的方法。 1. 接种一个单菌落于5 ml无菌LB培养液中,在37°C培养至饱和状态(过夜)。 2. 取...
低拷贝质粒：1~3份拷贝，“严紧型”stringentplasmid高拷贝质粒：10~60份拷贝“松弛型”relaxedplasmid质粒载体必须具备的条件：具有复制起点具有抗菌素抗性基因具有若干限制酶单一识别位点具有较小的分子量和较高的拷贝数 3 质粒构型 从细胞中分离质粒DNA时，质粒DNA通常会呈现超螺旋构型（SC构型），另外也会有开环DNA...
而且在提取进程中,无需酚-氯仿抽提、无需酒精沉淀,可在较短时刻内完成质粒的提取和纯化。 四 1.细菌培育及菌体的收成。 2.用试剂盒进行小量质粒制备。 五 1.将菌株接种到液体LB培育基中,加入氨苄青霉素至100g/ml,150rpm振荡16h; 2.吸取培育菌液与离心管中,13000rpm室温下离心2min。倒掉上清,然后倒置于...
一、原理 质粒(plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1~200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒在细胞 ...
本文介绍了强碱法小量制备质粒DNA的原理及操作流程。有助于了解基因工程操作中运载基因的载体,掌握最常用的提取质粒DNA的方法。 实验原理 碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。利用溶菌酶、强碱(NaOH)及表面活性剂(SDS)使细胞破壁、膜,释放出胞内染色体DNA,质粒DNA及其它物质,通过一...