而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构。通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。 操作步骤 1. 将含有puc19质粒的大肠杆菌100μl接种到含氨卞青霉素(100μg/ml)的LB培养液中,在37℃振摇过夜。 2. 取1.5ml培养物转入Eppendorf管中,8000rpm离心1分钟。(如菌液较稀...
1.菌种 含 pBR322 或其他质粒 DNA 的大肠杆菌工程菌如 HB101 , DH5 α, JM109 等,如实验后需直接酶切制备的质粒 DNA ,可选用科研工作中用 Eco R Ⅰ非定向克隆构建的重组质粒 DNA 转化的大肠杆菌,如本实验选用的是实验九制备的 含人 Bcl-2 重组质粒的 DH5 α。 2. LB 液体培养基 称取胰蛋白胨 3....
小规模快速制备质粒DNA是筛选大批重组质粒的阳性克隆的一个不可缺少的步骤,常规经典的方法是碱裂解法.通过该方法制备出来的质粒DNA既可进行琼脂糖凝胶电泳,也可进行限制性酶切分析.但该方法在一次筛选数十个克隆时就显得操作步骤繁琐,费时较多.今介绍一种经...doi:CNKI:SUN:JCYL.0.1998-05-015刘新光广东医学院...