免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术,其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA\|Pansobin...
对于同时具有多个定位的“客户”蛋白(client),研究团队通过偶联生物素连接酶(BirA)的特定生物分子凝集体的“骨架”蛋白对其进行标记,与DenseMAP的凝聚增强交联相互配合,能够特异地捕捉位于感兴趣的生物分子凝集体内的POI的互作蛋白质组。根据这一思路,利用G3BP1-BirA结合δK*,捕捉和鉴定了应激颗粒(SG)中SARS-CoV-2的...
Pull-down技术常用于体外蛋白互作检验,与LC-MS/MS技术相结合以发现新的互作蛋白。 ⏩Pull-down技术基本原理是用固相化的、已标记的诱饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从目标裂解液中钓出与之相互作用的未知靶蛋白。即将诱饵蛋白(标签蛋...
免疫共沉淀主要是用来研究蛋白质与蛋白质相互作用的一种技术，其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Pansobin珠上的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)，若细胞中有正与兴趣蛋白结合的目的蛋白，就可以形成这样一种复合物：“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—SPA\|Panso...
酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的,研究活细胞内蛋白质相互作用,对蛋白质之间微弱的、瞬间的作用也能够通过报告基因的表达产物敏感地检测得到,它是一种具有很高灵敏度的研究蛋白质之间关系的技术。酵母双杂交技术既可以用来研究哺乳动物基因组编码的蛋白质之间的互作,也可以用来研究高等植物基因组编码的蛋白质之...
蛋白质与蛋白质互作技术，如酵母双杂交系统，利用诱饵蛋白表达标志基因检测相互作用，包括单杂交、三杂交和反向杂交等，丰富了功能研究。噬菌体展示技术通过表面展示抗体筛选蛋白相互作用，具有高通量和特异性筛选优点。等离子共振技术通过薄膜共振性质变化测量蛋白结合，无需标记，实时监测。荧光能量转移技术结合...
双分子荧光互补技术是指荧光蛋白多肽链在某些不保守的氨基酸处切开,形成不发荧光的N-和C-末端2个多肽片段。将这2个荧光蛋白片段分别连接到1对能发生相互作用的目标蛋白上,在细胞内共表达或体外混合这2个融合蛋白时,由于目标蛋白质的相互作用,荧光蛋白的2个片段在...
蛋白质互作技术 蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分。机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。正是因为蛋白质的重要作用,所以蛋白质也一直是科研工作者研究的热门对象,本次小海星就为大家介绍一下蛋白质互作技术。 1 酵母双杂交系统 酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重要方法。
AlphaFold3..专题一介绍了转录因子与靶基因启动子互作,本次介绍蛋白质与蛋白质互作预测。先上应用实操总结(同专题一总结类似,看过可忽略直接进入实操正文):优点:利用AlphaFold3预测目的蛋白与候选蛋白互作,目前
前面我们介绍了mRNA display的方法原理,今天分享的这项研究就是基于mRNA display开发用于蛋白质-蛋白质互作鉴定的PROPER-seq方法。 传统针对蛋白质-蛋白质的互作鉴定多依赖于蛋白质质谱的鉴定,而PROPER-seq将蛋白质-蛋白质互作的的鉴定转换为RNA-RNA的嵌合鉴定,通过高通量测序可以实现大规模的蛋白质-蛋白质互作鉴定。