一种荧光定量RT-PCR鉴别检测蓝耳病毒株的方法,包括以下步骤:1)采集血样,提取RNA,并设计特异性引物;上游引物的核苷酸序列为:CTTCCGACACCATCCGAG,下游引物的核苷酸序列为:TTGGCAGGTTGGTCACAG;2)以步骤1)所提取的RNA为模板,加入特异性引物,特异性引物的终浓度为0.2μMol/L;用TARAKA试剂盒反转录,用SYBR Green试剂盒...
荧光定量RT-PCR为建立一种能快速,简便,灵敏地检测人双埃克病毒( Human Parechovirus,HPeV)SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank发表的人双埃克病毒8个基因型的参考毒株全序列,针对5 ′端非编码区保守序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR扩增此靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板,经过优化反应条件...
评价方法的灵敏度;提取TGEV、PDCoV、PoRV、CSFV、PRRSV等病毒RNA,以建立的SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法进行检测,评价方法的特异性;取3份PEDV阳性临床样品进行SYBR Green I荧光定量RT-PCR扩增,评价该方法的批内和批间重复性。
方法利用 aqMan 探针 建立实时荧光定量 R -PCR 方法 通过对登革热病毒 RNA 定量外标准品的定量分析 优化反应体系 检测 aqMan 探针实时荧光定量 R -PCR 方法的灵敏度、特异性和重复性。 结果方法检测灵敏度可达 1×1 3copies mL 特异性及重复性良好 对同一样品进行 5 次重复检测 其循环阈值的平该均标准偏差...
(4)使用步骤(1)的引物和探针对待测样品进行TaqMan荧光定量RT-PCR扩增反应; (5)结果检测:通过荧光定量PCR仪自带软件读取相应的Ct值,判定待测样品阳性或阴性。 6.根据权利要求5所述的TEGV荧光定量RT-PCR检测方法,其特征在于,所述引物浓度为10μmol/L,所述探针浓度为10μmol/L。 7.根据权利要求5所述的TEGV荧...
《猪流行性乙型脑炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法》是2020年04月03日实施的一项中国地方标准。编制进程 2020年03月03日，《猪流行性乙型脑炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法》发布。2020年04月03日，《猪流行性乙型脑炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法》实施。起草工作 起草单位：浙江省动物疫病预防控制中心。主要起草人：谢荣辉...
现有第五版新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案中,关于确诊病例需要两个病原学证据之一,其一是呼吸道标本或血液标本实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性,其二是呼吸道或血液标本基因测序,与已知的新型冠状病毒高度同源。综合考虑时间、费用尤其是病患较多等诸多情况,前者对于已感染病患的确诊来说尤为重要。
方法：本实验建立的荧光定量RT-PCR检测方法包括引物的设计与合成、总RNA提取、反转录和荧光定量PCR检测步骤。对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验。结果：成功设计合成引物，上游引物QCSFV-F，序列为：CCCTCCAGCGACGGCCG；下游引物QCSFV-R，序列为：ACTTAGACCACCCAGGGAG。本实验检测方法可特异性检测CSFV，方法重复...