主要的不利因素是特殊蛋白的结构和缓冲液中的干扰剂。 扩展资料: 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程: 1、Bradford浓染液的配制:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml85%的磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml,此染液放4℃至少6个月保持稳定。 2、标准曲线蛋白质样本的准备:尽量使用与待测样本性质相近...
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色,用分光光度计在吸光度595nm处读数,通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线,再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构,缓冲液组分中有干扰试剂等。双缩脲法和Folin—酚试剂法...
采用Bradford法,即考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。原理是考马斯亮蓝在电离状态下呈现棕红色,最大吸光量为488nm。当与蛋白质结合时,它变成蓝色,并且蛋白质与色素结合时在波长595nm处吸收光最大。其吸光值与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质的定量测定。蛋白与考马斯亮蓝在2min左右达到平衡,反应非常...