相关知识点: 试题来源: 解析 C [考点] 分光光度法测定蛋白质浓度。 考马斯亮蓝法比双缩脲法敏感,在一定浓度范围符合比尔定律,但要求蛋白质为水溶性。由于已经显色,使用普通比色杯即可。紫外法测定时才需要石英比色杯。石英比色杯对紫外光基本无吸收。
考马斯亮蓝试剂/ml 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 各管混匀后,静置3min,以0号管为空白管调零,在595nm波长下分别测定各管溶液的吸光度值(A595值)。以吸光度值为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标,绘出标准曲线。 二、血清蛋白质浓度测定 测定方法同上。1mL稀释血清加2.5mL考马斯亮蓝试剂,血清用0.9%NaCl稀释200倍,使其测定...
考马斯亮蓝 (Coomassie Brilliant Blue) 法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量测定微量蛋白浓度快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。目前,这一方法是也灵敏度最高的蛋白质测定法之一。 考马斯亮蓝 G-250 染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染...
考马斯亮蓝法测定蛋白浓度二实验材料1实验设备电子天平分光光度计恒温水浴锅2试剂考马斯亮蓝g250牛血清蛋白nacl95乙醇85磷酸三操作步骤一试剂配制1考马斯亮蓝g250溶液配制准确称取01考马斯亮蓝g250溶于50ml95乙醇加入100ml85磷酸最后用蒸馏水稀释定容到1000ml 考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 一、实验原理 考马斯亮蓝G...
考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡...
Bradford蛋白质测定法是根据蛋白质与染料结合的原理设计的。考马斯亮蓝染料(G-250)在酸性溶液中与蛋白质的碱性氨基酸和芳香族氨基酸残基结合,使得染料的最大光吸收峰位置由原来的465nm变为595nm,溶液颜色也由原来的棕红色变为蓝色,反应迅速且稳定,形成的化合物颜色深浅在一定范围内与蛋白质浓度成正比关系,因此可通过...
考马斯亮蓝结合法是近年来发展起来的蛋白质定量测定法。考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合,这种结合具有高敏感性,考马斯亮蓝G - 250的最大光吸收峰在465 nm,当它与蛋白质结合形成复合物时,其最大吸收峰改变为595 nm。考马斯亮蓝G - 250 -1、蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高敏感度...
该方法的原理是:蛋白质中含有苯并嘧啶基团,当蛋白质与考马斯亮蓝发生反应时,会产生蓝色的荧光。因此,可以根据荧光的强度来测定蛋白浓度。 测定蛋白浓度的具体步骤如下: 1.准备样品。取一定量的蛋白样品,加入适量的缓冲液,搅拌均匀。 2.加入考马斯亮蓝溶液。将考马斯亮蓝溶液加入样品中,搅拌均匀。 3.测定荧光...
蛋白质含量的测定 ——考马斯亮蓝染色法(Bradford法)实验人员:董佳琦潘立 一、实验目的 掌握Brodford法测量蛋白质浓度的原理和操作技术。二、实验原理 考马斯亮蓝法是根据蛋白质与染料相结合的 原理设计的,这是一种迅速,可靠的通过染色法 测定溶液中蛋白质浓度的方法。尽管相对于其他方法来说,此...