考马斯亮蓝法测蛋白质含量实验步骤 1.准备工作。 在进行考马斯亮蓝法实验之前,首先需要准备好以下材料和试剂: 1.蛋白质样品。 2.考马斯亮蓝法试剂盒。 3.组织破碎工具(如超声波破碎器或机械破碎器)。 4.离心管 5.分光光度计。 6.蒸馏水 2.样品处理。 1.将蛋白质样品溶解于适量的缓冲液中,确保样品完全...
考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量 一、实验目的 掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理和方法。学习分光光度计的原理及使用方法。 二、实验原理 三、实验步骤 试剂 试管编号 0 1 2 3 4 5 6 7 标准蛋白质溶液/ml 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 样品0.1 样品0.1 相当于蛋白质含量/微克 0.00 20 40 60 80...
取试管从层析样品中各取20.0ul,加入生理盐水20ul,最后加入考马斯亮蓝G-250溶液5.0ml,混匀,以595nm波长测定二者光密度,在标准曲线上查出其蛋白浓度 以上需要购买的试剂有:1、标准蛋白质即牛血清白蛋白。 教学内容: 实验八考马斯亮蓝法(Bradford法)测定蛋白质含量 【实验目的】 1. 掌握考马斯亮蓝染色法定量测定...
(2)实验步骤: ① Bradford浓染液的配制:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85%的磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml。 ② 标准曲线蛋白质样本的准备:尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品,例 如测定抗体,可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的,也可用抗体作为标准蛋 白。通常...
简述考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的过程如下：1、试剂准备：考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解，通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时，需要准备标准蛋白溶液，用于制作标准曲线。2、样本处理：将待测样本与缓冲液混合，然后用组织匀浆器匀浆，保证样本均匀。3、反应：将样本与考马斯亮蓝G-250染料混合，放入...
一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。二、蛋白质含量测定方法1、凯氏定氮法2、双缩脲法3、Folin-酚试剂法4、紫外吸收法5、考马斯亮蓝法三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准...
40.简述考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的实验原理,并简要写出用该方法测定某样品溶液中蛋白质含量的实验步骤
(2)蛋白质标准在考马斯亮蓝法中,由于最常用的蛋白质标准牛血清蛋白与染料的反应偏大,导致测定的样品蛋白含量偏低。因此,选择标准蛋白质建立标准曲线时,尽量采用与待测样品蛋白相同的蛋白质,或者选用与染料结合能力接近于蛋白质平均值的牛γ球蛋白为蛋白质标准,以减小偏差。在具体报告 测定量时,必须说明所用的蛋白质...
实验11 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量(2)试剂、器材、实验材料及操作步骤 正误判断题:(1)要用双蒸水配制考马斯亮蓝G-250试剂。( )(2)配制好考马斯亮蓝G-250试剂后,要用滤纸过滤,否则会严重影响比色测定。( )(3)制作标准曲线时,用稀盐溶液补足总体积是为了防止蛋白质变性。( )(4)黄豆芽蛋白样品的提取包括...