在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最大光吸收来确定蛋白质的含量。 (2)实验步骤: ① Bradford浓染液的配制:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85%的磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量实验步骤 1.准备工作。 在进行考马斯亮蓝法实验之前,首先需要准备好以下材料和试剂: 1.蛋白质样品。 2.考马斯亮蓝法试剂盒。 3.组织破碎工具(如超声波破碎器或机械破碎器)。 4.离心管 5.分光光度计。 6.蒸馏水 2.样品处理。 1.将蛋白质样品溶解于适量的缓冲液中,确保样品完全...
(2)蛋白质标准在考马斯亮蓝法中,由于最常用的蛋白质标准牛血清蛋白与染料的反应偏大,导致测定的样品蛋白含量偏低。因此,选择标准蛋白质建立标准曲线时,尽量采用与待测样品蛋白相同的蛋白质,或者选用与染料结合能力接近于蛋白质平均值的牛γ球蛋白为蛋白质标准,以减小偏差。在具体报告 测定量时,必须说明所用的蛋白质...
40.简述考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的实验原理,并简要写出用该方法测定某样品溶液中蛋白质含量的实验步骤
实验11 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量(2)试剂、器材、实验材料及操作步骤 正误判断题:(1)要用双蒸水配制考马斯亮蓝G-250试剂。( )(2)配制好考马斯亮蓝G-250试剂后,要用滤纸过滤,否则会严重影响比色测定。( )(3)制作标准曲线时,用稀盐溶液补足总体积是为了防止蛋白质变性。( )(4)黄豆芽蛋白样品的提取包括...
(2)实验步骤: ① Bradford浓染液的配制:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% 的磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml。 ② 标准曲线蛋白质样本的准备:尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品,例 如测定抗体,可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的,也可用抗体作为标准蛋 白。通常...
简述考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白质含量的实验原理,并简要写出用该方法测定某样品溶液中蛋白质含量的实验步骤。 参考答案: (1)实验原理: 考马斯亮蓝 G-250 分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作用,两者互作的结...点击查看答案 ...