(1)实验原理: 考马斯亮蓝G-250分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作 用,两者互作的结果使G-250分子的最大光吸收从465nm转移至595nm。在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最...
总的来说,考马斯亮蓝法是一种简便、灵敏、稳定的蛋白质含量测定方法,其原理是利用考马斯亮蓝与蛋白质形成络合物,通过比色测定蛋白质含量。在进行测定时,需要注意样品制备、反应时间和吸光度测定等关键操作,以确保测定结果的准确性和可靠性。考马斯亮蓝法已成为蛋白质研究中常用的技术手段,为科研工作者提供了重要的...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量原理如下: 考马斯亮蓝在酸性溶液与蛋白质结合,在595nm波长处呈最大吸收,其光吸收值与蛋白质含量呈正相关。 基本步骤包括: 用0.25%胰蛋白酶消化细胞,制成悬液,用10%胎牛血清的RPMI1640培养液调整细胞密度为1×104细胞/ ml,接种于24孔培养板,每孔1ml,置37℃5%CO2条件下培养一定时间...
考马斯亮蓝法测蛋白质含量原理 考马斯亮蓝法(Bradford method)是实验室中最常用的蛋白质定量方法之一,以其操作简便、快速、灵敏度高而著称。该方法基于考马斯亮蓝 G-250 染料与蛋白质结合的原理,通过测定溶液颜色的变化来推算蛋白质的浓度。 1. 染料与蛋白质的结合反应 考马斯亮蓝 G-250 在酸性溶液中呈红色,...
考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
考马斯亮蓝染色法(Coomassie Brilliant Blue staining method)是一种常用于测定蛋白质浓度的方法。其原理基于考马斯亮蓝染料与蛋白质发生可逆结合的特性。当染料与蛋白质结合时,会导致染料的吸光特性发生改变,其最大吸收波长会从465 nm变到595 nm。 在酸性条件下,染料中的磷酸基团会被部分质子化,使染料带正电,而...
采用Bradford法,即考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。原理是考马斯亮蓝在电离状态下呈现棕红色,最大吸光量为488nm。当与蛋白质结合时,它变成蓝色,并且蛋白质与色素结合时在波长595nm处吸收光最大。其吸光值与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质的定量测定。 蛋白与考马斯亮蓝在2min左右达到平衡,反应非常迅速。粘结剂在...
简述考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白质含量的实验原理,并简要写出用该方法测定某样品溶液中蛋白质含量的实验步骤。 参考答案: (1)实验原理: 考马斯亮蓝 G-250 分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作用,两者互作的结...点击查看答案 ...