10.培养器具和废弃物的处理 培养器具应进行彻底的清洗和消毒。废弃物应根据相关规定进行处置。 总结: 悬浮细胞培养是一种重要的细胞培养方法,通过合适的培养条件、定期观察和维护,可以获取到大量的细胞,并用于进一步的实验。悬浮细胞培养的基本步骤包括细胞的分离、计数与调整、悬浮培养体系的建立、环境条件的调整、培养...
步骤一:选择适当的培养基 在进行悬浮细胞培养前,需要选择适合细胞生长的培养基。常用的培养基有RPMI-1640、DMEM等,其中含有丰富的营养物质和生长因子,可以满足细胞的生长需求。 步骤二:准备培养器具 在进行悬浮细胞培养前,需要准备一些必要的培养器具,如离心管、培养瓶、移液管等。这些器具需要事先进行无菌处理,以确保...
1. 将准备好的冻存细胞放入37℃水浴中解冻。 2. 用70%乙醇对顶端进行消毒,用吸管将细胞转移到含有5mlwan全MEM-10培养基的25cm2组织培养瓶中,轻轻摇动培养瓶,使细胞均匀分布于培养瓶中,放入5%CO2加湿培养箱中37℃培养过夜。 3. 将培养基吸出,用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆盖细胞,消化30~40s。 4. 加入10ml旋...
细胞传代步骤 一、贴壁细胞：以HeLa细胞的传代培养为例 1. 选取生长密度 80%左右即处于生长对数期的HeLa细胞，在超净工作台中操作，吸去培养皿中的旧培养基，加入1-2 mL的PBS溶液，轻轻润洗，漂洗细胞以除去残留的血清。2. 吸去培养皿中的PBS溶液，加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶消化液（消化液能够覆盖细胞即可...
悬浮细胞使用CCK-8进行细胞增殖或毒性检测的步骤如下：准备细胞悬液：首先收集对数生长期的悬浮细胞，并调整细胞悬液的浓度。接种细胞：将细胞悬液加入96孔板中，每孔约100μl，以达到适当的细胞密度（通常为1000-10000个细胞/孔）。预培养：将含有细胞的96孔板放入37℃、5% CO2的培养箱中预培养，直至细胞附着或...
第一步:选择培养基 选择适合细胞生长的培养基是细胞悬浮培养的第一步。培养基中含有维持细胞生长所需的营养物质,如氨基酸、糖类、维生素等。此外,还需添加适量的生长因子和激素,以促进细胞的增殖和分化。对于不同种类的细胞,所需的培养基成分也有所不同。因此,在进行细胞悬浮培养之前,我们需要根据细胞类型选择合适的...
操作步骤 1.配制培养基 (1) 用于诱导水稻愈伤组织的培养基(N6)。 (2) 用于水稻悬浮培养的液体培养基。 按照培养基配方取各种药品,zui后用蒸馏水定容到所需体积。所配制的培养基经高压蒸汽灭菌后备用,固体琼脂培养基分装在250mL 的锥形瓶内,每瓶约分装30mL。
将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。二、 悬浮细胞传代操作步骤 悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养...
表1.悬浮细胞与贴壁细胞的比较: 贴壁细胞传代 您已检查细胞培养物的融合度,并且它们已准备好传代。接下来该做什么?传代贴壁细胞主要有四个步骤: 1、PBS洗涤 2、消化/解离 3、终止消化 4、接种 ...
U-937悬浮细胞培养步骤 U-937细胞是一种人组织细胞淋巴瘤细胞，它们在体外培养中以悬浮生长的形式存在。以下是U-937悬浮细胞的基本培养步骤：1.培养基准备：U-937细胞通常在含有10%胎牛血清和1%双抗的RPMI-1640培养基中培养。培养条件为37°C、5% CO2和相对湿度70%-80%。U-937细胞 2.细胞复苏：如果细胞是从...