(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍胰蛋白酶量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心...
细胞传代需要注意分板比/接种密度。不同的细胞系通常需要满足特定的分板比/接种密度,务必查看所用细胞系的培养指南。生长较快的细胞可能需要高分板比(低接种密度),而生长缓慢的细胞可能需要低分板比(较高接种密度)。如果细胞长时间无人看管(例如公共假日或周末),建议使用低于正常水平的分板比/接种密度。但是...
(1)第一次开始培养某种细胞时,一定要在WWW. ATCC. ORG上用该细胞的名称进行检索,可以得到关于该细胞的详细信息,包括需要使用的培养基、血清、添加剂、通常的消化时间、传代时间等。对于特定的细胞(如原代培养的细胞),需要查阅相关文献来获得更准确的培养方法。 (2)进入细胞间开始细胞培养时,必须严格按照下列步骤操...
1 接受细胞:和细胞的初次相遇 ▐ 01 记录细胞重要信息 ▐ 02 培养细胞的形态观察 2 细胞处理:具体操作指南! 3 培养基选择:给细胞吃“饱”适当“加餐” 4 细胞传代:细胞也要“传宗接代” Tips:胰蛋白酶传代培养细胞的最佳方法 5 细胞冻存 & 复苏:让细胞“永葆青春” 相关产品 参考文献 师妹:“培养基...
1. 操作步骤 (1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液。 (2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜。 (3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化。
实验室技能get✅细胞培养 图1是整理的简单步骤,图2是今天在实验室总结记录的 1⃣物品准备 2⃣细胞复苏 3⃣超净台超净台的使用 4⃣细胞冷冻 5⃣细胞传代 6⃣完全培养基的配制0 0 发表评论 发表 作者最近动态 眉眼如初菜菜牛 2024-12-29 9个创意中秋活动,让节日不再单调!中秋...全文 +2 眉眼...
一、巨噬细胞 1.实验材料和仪器 试剂:75%乙醇、RPMI-1640培养基、M-CSF、Gomori酸性磷酸酶、CD14-FITC和IgG2-FITC等。仪器及耗材:注射器、小鼠解剖台、离心机、离心管、流式细胞仪、细胞计数仪等。2.操作步骤 2.1 颈椎脱臼处理6只C57BL/6小鼠,75%酒精浸泡消毒5分钟。无菌手术取出股骨,尽量去除周围肌肉组织...
1. 细胞处理后的第二天,在显微镜下观察细胞状态,如死细胞较多且细胞密度较低,需要进行换液操作。(1)悬浮细胞请在高倍镜下观察,一般而言,活细胞轮廓圆润、界限清晰、透明度大、折光性强。如细胞活率较高,则继续正常培养。(2)贴壁细胞如观察到较多细胞漂浮,请在高倍镜下观察,判断漂浮着的细胞是死细胞...
三、细胞复苏(1)超净台紫外杀菌,取出培养液置于传递窗中。(2)杀菌到时后,进入细胞间,穿好实验服,戴上口罩与乳胶手套。(3)关闭紫外,培养液转入超净台前先喷洒酒精。(4)酒精棉擦手后,先在超净台中取 9、出10 mL含血清培养液,置于15 mL离心管中待用。(5)准备一杯37 °C左右的温水,将细胞取出液氮罐,...
下面细胞培养操作详述: 1、复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第2...