细胞培养操作规程 一、目的 本规程旨在规范细胞培养操作流程,确保细胞培养的质量和稳定性,为实验研究提供可靠的细胞来源。 二、适用范围 本规程适用于所有细胞培养实验,包括胚胎干细胞、急性髓系细胞白血病细胞、L Wnt-3A细胞等。 三、操作步骤 1. 细胞复苏 1.1 将冻存的细胞悬液从液氮中取出,迅速放入37℃水浴中,...
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
2.操作要求 为了保持细胞培养室的洁净和细胞的无菌状态,请遵守以下要求: -进入细胞培养室前,请先穿戴干净的实验服和手套。 -禁止携带任何未经消毒的物品进入细胞培养室,包括食物和饮料。 -在离开细胞培养室前,请使用培养室专用消毒液清洁双手和操作台面。 -所有细胞培养器材和试剂都需要进行严格的消毒和清洁处理。
1)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留...
CIK细胞培养标准操作规程 1 操作步骤 1.1 CIK原代细胞的制备 1.1.1 将外周血,均匀分至2管,室温下,离心。 1.1.2 将上层血浆转入离心管,灭活后离心,取上清备用。 1.1.3 使用等体积的生理盐水与血细胞沉淀混匀后,小心加到Ficoll层上,使分层保持清晰。 室温,离心。 1.1.4 吸取外周血单个核细胞(PBMC)层,尽量吸...
在进行细胞培养室实验时,需按照以下操作规程进行: -打开细胞培养室的门时,先用消毒剂擦拭手部,然后使用洗手液洗手并彻底冲洗干净。 -进入细胞培养室后,先进行操作台和培养器具的消毒处理,使用消毒剂彻底擦拭工作面和器具表面。 -进行各项实验操作前,务必佩戴好手套,勿将裸露的手部接触培养物或实验器材。 -操作过程中...
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入...
第五条 传代操作步骤 细胞观察:在显微镜下观察细胞形态,确认细胞健康状况。 培养基更换:使用无菌操作吸去旧培养基,加入适量的胰蛋白酶。 细胞分离:待细胞变圆后,轻敲培养瓶,使细胞脱落。 细胞计数:使用血细胞计数板或自动细胞计数仪进行细胞计数。 细胞传代:根据细胞密度和传代比例,将细胞加入新的培养基中。 第六...
题目: 293T细胞培养操作规程 1 目的293T细胞是常用于包装和扩增病毒载体的工具细胞, 因此做好 293T 细胞的培养, 为保证相关实验的正常进行提供必要条件。 2 适用范围本部门 293T 细胞培养 3 操作方法 3.1将移液器和移液枪、 15ml 离心管、 离心管架、 75cm2新的细胞培养瓶放于生物安全柜中, 按照生物安全...
二、人急性淋巴细胞白血病细胞复苏、传代及冻存流程参考 1、人急性淋巴细胞白血病细胞复苏 1)配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置); 2)细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右...