原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基磺酸钠), SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合物...
不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样,而长轴则随蛋白质相对分子质量的大小成正比的变化。这样的蛋白质-SDS复合物在凝胶中迁移率,不再受蛋白质原有电荷和形状的影响,而只与蛋白质相对分子质量的相关。因此,SDS-PAGE不仅可以分离蛋白质,而且可以根据迁移率的大小测定蛋白质的分子量。(10分) 3、列举RNA提取的...
2、 简述SDS-PAGE凝胶电泳测定蛋白质分子量的原理。 答:十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前用于测定蛋白质分子量最好的方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上,蛋白质样品可根据其分子大小、形状以及所带电荷多少等因素造成的电泳迁移率的差别而得到分离(4分...