根据磷酸氨基酸残基的不同，可将磷酸化蛋白质分为4类，即O-磷酸盐蛋白质、N-磷酸盐蛋白质、酰基磷酸盐蛋白质和S-磷酸盐蛋白质。• O-磷酸盐蛋白质通过羟氨基酸（如丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸）的磷酸化形成• N-磷酸盐蛋白质通过精氨酸、赖氨酸或组氨酸的磷酸化形成• 酰基磷酸盐蛋白质通过天冬氨酸或谷氨酸的...
免疫共沉淀方法,是专门用于富集酪氨酸磷酸化的主流方法,结合了基于金属的富集方法和基于 抗体的富集方法中的优势,该方法能够高特异 性的对酪氨酸磷酸化位点进行富集.目前,针对酪氨酸的特异性抗体正在不断涌现. 2. 富集方法的发展 肽段的检测深度依赖于酶解效率、传统的胰酶 (trypsin)酶解,能够在赖氨酸和精氨酸的 C...
磷酸化肽段富集方法的原理是基于亲和吸附,将磷酸化肽段与非磷酸化肽段进行分离。常见的富集方法包括IMAC(金属离子亲和层析)、TiO2(钛离子亲和层析)、MOAC(磷酸酯酶结合富集)等。其中,IMAC是最常用的富集方法之一,它利用金属离子与磷酸基团之间的亲和力使得磷酸化肽段与非磷酸化肽段分离。TiO2富集方法则利用钛离子与磷酸...
因此,目前对Ⅳ_磷酸化蛋白质的研究仍处于初始阶段。该文针对蛋白质Ⅳ-磷酸化修饰的特点、富集和鉴定方法进行了综述,并对其发展前景进行了展望。关键词:蛋白质Ⅳ_磷酸化修饰;富集;检测;综述中圈分类号:0658 文献标识码:A 文章编号:1000_8713(2020)03一0278·09Adva的ces in enrichment and detection methodsfbr肛...
1磷酸化肽段富集方法 1.1亲和色谱法 近年来,基于亲和色谱的固定化金属离子亲和色谱 (immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC) 和金属氧化物亲和色谱(metal oxide affinity chromatography, MOAC) 的方法快速发展。亲和色谱富集磷酸化肽段...
蛋白质磷酸化作为一种最普遍和最重要的翻译后修饰调控着几乎所有的生命过程。随着高效富集方法和生物质谱技术的快速发展,低丰度的蛋白质O-磷酸化修饰获得了规模化鉴定,从而使其生物学功能得到较为透彻的研究。而发生在组氨酸、赖氨酸和精氨酸侧链氨基的N-磷酸化修饰,由于P-N键化学稳定性差,导致其在酸和热条件下不...
02富集方法 由于生物样本中蛋白质N-磷酸化的丰度低, 质谱信号易受高丰度组分抑制, 因此对N-磷酸化蛋白质/肽段进行有效富集已成为提高其检测灵敏度的必要和关键步骤。目前, N-磷酸化蛋白质/肽段的富集方法主要包括抗体法、固定化金属亲和色谱法和色谱保留时间差异法等。
( No. 2007BS02003) 资助* * Corresponding authore-mail: ybwang@ sdut. edu. cn蛋白质组学中磷酸化肽的常用富集方法*李鹏章王粤博* *( 山东理工大学化学工程学院淄博 255049)摘要磷酸化作用是最重要的蛋白质翻译后修饰方式之一, 它是蛋白 质组学的一个重要分支, 在细胞识别、细胞信息传递、基因表达和新陈...
本发明公开了一种磷酸化肽段富集的方法,检测和定量的方法.其中,磷酸化肽段富集的方法包括蛋白质组样本的裂解,酶解和基于二氧化钛的磷酸化肽段富集的步骤,其中,蛋白质组样本的裂解,酶解后得到的溶液中包含磷酸化肽段和非磷酸化肽段,磷酸化肽段和非磷酸化肽段之和为总肽段,在基于二氧化钛的磷酸化肽段富集的步骤...