磷酸化肽段富集方法的原理是基于亲和吸附,将磷酸化肽段与非磷酸化肽段进行分离。常见的富集方法包括IMAC(金属离子亲和层析)、TiO2(钛离子亲和层析)、MOAC(磷酸酯酶结合富集)等。其中,IMAC是最常用的富集方法之一,它利用金属离子与磷酸基团之间的亲和力使得磷酸化肽段与非磷酸化肽段分离。TiO2富集方法则利用钛离子与磷酸...
1磷酸化肽段富集方法 1.1亲和色谱法 近年来,基于亲和色谱的固定化金属离子亲和色谱 (immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC) 和金属氧化物亲和色谱(metal oxide affinity chromatography, MOAC) 的方法快速发展。亲和色谱富集磷酸化肽段的过程主要涉及3个步骤 (图1B):(1) 孵育:磷酸化蛋白质/肽段上带...
MOAC 方法建立约 10 年,利用氧化金属可以和磷酸根基团中的氧结合的特性进行磷酸化肽段的富集。氧化钛(TiOx)是最常用的 MOAC 试剂, 此外 Fe3O4 也比较常见。 IMAC 和 MOAC 方法都可以对磷酸化肽段或者蛋白质进行富集,二者都容易受到酸性肽段影响,比如多羧基集团的肽段会发生非特异性结合。IMAC 所得样品容易含有...
本发明公开了一种磷酸化肽段富集的方法,检测和定量的方法.其中,磷酸化肽段富集的方法包括蛋白质组样本的裂解,酶解和基于二氧化钛的磷酸化肽段富集的步骤,其中,蛋白质组样本的裂解,酶解后得到的溶液中包含磷酸化肽段和非磷酸化肽段,磷酸化肽段和非磷酸化肽段之和为总肽段,在基于二氧化钛的磷酸化肽段富集的步骤...
专利摘要显示，本发明提供了一种一次富集实现单磷酸化肽段与多磷酸化肽段分离的方法，通过Fe‑IMAC材料一次富集，再经两次洗脱，第一次采用20％乙腈0.3％乙酸的酸性洗脱液洗脱出单磷酸化肽段，第二次采用100mM磷酸氢二钾碱性洗脱液洗脱出多磷酸化肽段，即可实现单磷酸化肽段与多磷酸化肽段的高效分离，从而实现...
系统对比表明该方法对酪氨酸磷酸化肽段的富集能力优于常见的多种商品化酪氨酸磷酸化抗体,且成本低廉。将该技术应用于9个细胞系酪氨酸磷酸化蛋白质组的分析,鉴定到10,030个高可信的酪氨酸磷酸化位点,其中36%的位点是首次鉴定得到,使酪氨酸磷酸化蛋白质组学的分析达到了一个新的深度和广度。酪氨酸磷酸化蛋白质组...
本方法也可 以选择性地提取 α2casein磷酸化蛋白 ,实现了简单 、 快速 、 高效的磷酸化肽段和蛋白的富集分离 。同时 ,通过 MALD I2TOF串级质谱分析 ,成功地完成了在优化条件下分离出的磷酸化肽段磷酸位点的鉴定 。 [ 1 ～4 ] [ 12 ] 关键词 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 ,介孔氧化铁 ,磷酸化肽段 ...
一种二维金属有机骨架纳米片富集磷酸化肽段的方法,包括如下步骤: (1)将二维金属有机骨架纳米片与富集溶液混合后超声使其混合均匀,得到分散溶液; (2)将待分离的磷酸化肽样品加入到上述分散的溶液中,涡旋30min进行富集,二维金属有机骨架纳米片表面丰富的金属结合位点可以与磷酸化肽段中的磷酸基团通过配位作用而结合;...
本发明属于无机材料和生化分析技术领域,具体为一种采用具有核壳结构的金属氧化物磁性微球分离富集磷酸化肽段的方法。本发明将上述磁性微球作为微吸附剂直接加入含有痕量磷酸化肽段混合溶液中,在一定条件下进行富集。操作简便,无需离心,避免了离心过程造成的“共沉淀效应”及传统固定金属离子亲和材料的“孔洞效应”,且具有...
可以用purimag的二氧化钛磁珠。发自小木虫IOS客户端