鉴定拟南芥T-DNA插入的突变体有专门的网站可以使用，它们分别是突变体突变信息查询网站，以及鉴定突变体的引物设计网站，具体的网站信息如下所示：突变信息查询网站：http://signal.salk.edu/cgi-bin/tdnaexpress/引物设计网站：http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 利用突变信息查询网站查询拟南芥T-DNA插入信...
它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP还能扩增出分子量较小的产物(小带);在...
所以利用农杆菌Ti质粒转化植物细胞,是获得植物突变体的一种重要方法。用PCR方法鉴定T-DNA插入船和突变体。农杆菌Ti质粒转化植物细胞后,在获得的后代分离群体汇总,有T-DNA插入的纯合突变体,杂合突变体和野生型。在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体,所以必须从分离群体中将纯合突变体鉴定出来。“三引物法”的原理...
打开的页面如下:点击点击T-DNA Express:输入基因名称输入基因名称AT1G69120,点击,点击search:82012.11.28查找基因查找基因AT1G69120从上述窗口中可以获得很多从上述窗口中可以获得很多不同的突变体,专找不同的突变体,专找SALK_冠名的那些,获得冠名的那些,获得比较方便且便宜,有利于插比较方便且便宜,有利于插入突变体...
人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植株。 除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。 4、T-DNA插入突变体PCR鉴定 图1结果鉴定图2PCR引物设计 三、 ...
1、拟南芥TDNA插入突变体的鉴定实验目的1. 熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;2. 掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突 变体的方法。DNA插入鉴定的原理LBa LBbpZone Exl5 Max N Ext3 pZone突变体鉴定的步骤1. T-DNA插入基因的基因组序列;2. T-DNA插入方向的确定;3. T-DNA插入位置的确定;4. 引物设计;...
除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。 4、T-DNA插入突变体PCR鉴定 图1结果鉴定图2PCR引物设计 三、 1、材料:T-DNA插入的突变拟南芥植株; 2、仪器:离心管,离心机,水浴锅,移液枪,PCR仪,电泳槽等; 3、试剂:液氮...
除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。图1结果鉴定4、 T-DNA插入突变体PCR鉴定WTHZHM■■■ 900410+N*N=0 300图2PCR引物设计三、实验材料1、 材料:T-DNA插入的突变拟南芥植株;2、 仪器:离心管,离心机,水浴锅...
在PCR 鉴定方法中,首先需要设计一对特异性的引物,用于扩增 ATSUC3 插入突变体中的特定片段。引物设计需要考虑插入突变体的 序列特征和扩增片段的长度等因素,以确保引物的特异性和扩增效率。 然后,需要提取待鉴定植物的DNA,常用的方法是采用CTAB 法或试 剂盒提取法。提取的DNA 需要经过纯化和回收,以去除杂质和核酸...
突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列；2.T-DNA插入方向确实定；3.T-DNA插入位置确实定；4.引物设计；5.PCR扩增；6.电泳检测。T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击sequenceviewer进入 点击nucleotideview进入 点击突变体编号后进入的网页 进入网站查找基因突变体及插入方向 实验设计 T-...