其原理简述如下: (1)构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒,如 pGL3-basic 等。 (2) 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染HEK293T细胞或其它相关的细胞系。如果此转录因子能够激活靶启动子,则荧光素酶基因就会表达,荧光素酶的表达量与转录因子的作用强度成正比。 (3)...
在Luciferase报告基因系统中，荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素，在这个氧化过程中会发出生物荧光。这种荧光可以通过荧光测定仪或液闪测定仪进行测定。由于荧光素酶具有出色的灵敏度、使用方便且可定量检测等优点，Luciferase报告基因系统被广泛应用于基因表达的检测。Luciferase报告基因系统的应用场景包括启动子与转录因...
Phospha-Light™检测系统是一种化学发光报告基因检测,用于灵敏检测用作报告蛋白的分泌型人胎盘碱性磷酸酶。 • 分泌型报告基因检测可在不破坏宝贵细胞的情况下进行分析。 • 碱性磷酸酶检测的宽动态范围使用户可以准确测量从飞克级到纳克级的酶水平。 • 与氯霉素乙酰转移酶 (CAT) 的同位素⁄非同位素检测或 ...
萤光素酶（Luciferase）报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测荧光素酶活性的一种报告系统。该系...
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化 luciferin 氧化成 oxyluciferin,在 luciferin 氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定luciferin氧化过程中释放的生物...
方法学上,主要围绕流式细胞术检测表达mito QC报告基因的细胞。该报告系统利用GFP的pH敏感性来区分健康的线粒体(mCherry+GFP+)和有丝分裂溶酶体(mCherry+GFP-),从而可以定量评估线粒体自噬。 (1)细胞培养和处理: •将稳定表达mito QC报...
3’UTR报告基因系统 由于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用,可以将目的基因3’UTR区域构建至报告基因luciferase的后面, 通过比较过表达或者干扰miRNA后,报告基因表达的改变(监测荧光素酶的活性变化)可以定量反映miRNA对目的基因的抑制作用;结合定点基因突变等方法进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。 根据您...
Luciferase报告基因系统是一种生物发光检测系统,主要用于检测基因的表达水平。它以荧光素(luciferin)为底物,通过检测荧光素酶(luciferase)的活性来反映基因的表达水平。 在Luciferase报告基因系统中,荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素,在这个氧化过程中会发出生物荧光。这种荧光可以通过荧光测定仪或液闪测定仪进行测定...
Luciferase 报告基因系统是一种生物技术工具，它利用生物发光现象来监测基因表达。该系统的核心在于荧光素酶与荧光素的反应。荧光素酶，作为一种催化剂，能将荧光素转化为氧化荧光素，这个过程会释放出可见的生物荧光，通过荧光测定仪进行测量。其优点在于灵敏度高，操作简便，可用于定量分析。这种系统在基因...
方法学上,主要围绕流式细胞术检测表达mito QC报告基因的细胞。该报告系统利用GFP的pH敏感性来区分健康的线粒体(mCherry+GFP+)和有丝分裂溶酶体(mCherry+GFP-),从而可以定量评估线粒体自噬。 (1)细胞培养和处理: •将稳定表达mito QC报告基因的ARPE-19细胞在补充有FBS,L-谷氨酰胺和抗生素的DMEM:F-12培养基...