荧光素酶报告基因系统是一种通过荧光素酶催化荧光素氧化产生生物荧光来检测荧光素酶活性的方法。萤火虫荧光素酶通常作为主报告基因，而海肾荧光素酶则用作内参，以平衡细胞数量、转染效率、表达效率的差异。该系统在研究调控元件功能、miRNA靶位点以及信号通路方面有着广泛应用。例如，通过构建报告基因质粒与表...
将miRNA的靶标3' UTR目的基因构建至报告基因下游,可以用于验证miRNA与靶基因的直接靶向关系。 3.信号通路的研究 经典的ADCC/ADCP效应也可采用报告基因法研究,经典的检测方法采用供者的外周血单核细胞PBMC或自然杀伤细胞NK作为效应细胞,这类难于获得,制备难度大,不稳定,强烈影响其作为抗体药研发生产的活性检测方法。可...
本发明首次提出Ub-Nanoluc报告 基因系统可以用来检测一些去泛素化酶的活性,本发明首次提出Ub-Ub-GS-Nanoluc报告 基因系统能有效检测重要免疫调控因子0TULIN活性。本发明为新的去泛素化酶抑制剂的 筛选提供了一条新的途径和选择。[0011] 本发明提出的Ub-Nanoluc报告基因系统包括泛素蛋白和Nanoluc突光素酶,所述 泛素...
单荧光素酶检测系统是以萤火虫荧光素酶为实验报告基因,实验结果易受各种实验条件影响。双荧光素酶检测系统是在单荧光素酶检测系统基础上,引入海肾荧光素酶作内参基因,消除了因细胞转染、细胞活性等因素带来的组间误差,实验准确性更高。 双荧光素酶检测系统具有灵敏度高、检测快速、使用方便、应用范围广等优点。双荧光...
报告基因检测流程主要有4个模块:分别是质粒构建、细胞转染、报告基因检测和数据分析。 质粒构建 双萤光素酶报告基因系统一般将萤火虫萤光素酶报告基因质粒和海肾萤光素酶报告基因质粒共转染细胞,或将这两个报告基因构建到同一个骨架质粒上(如pGL4质粒),分别用不同的启动子启动其表达。
“应用于筛选生物被膜抑制剂的报告基因系统”可用于筛选能够抑制铜绿假单胞菌生物被膜形成的小分子化合物...
1.一种Ub-Nanoluc报告基因系统,其特征在于,所述Ub-Nanoluc报告基因包括泛素蛋白和 Nanoluc荧光素酶,所述泛素蛋白与Nanoluc荧光素酶通过肽腱相连。 2.如权利要求1所述的Ub-Nanoluc报告基因系统,其特征在于,所述Ub-Nanoluc报告基因 的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述泛素蛋白和 ...
“应用于筛选生物被膜抑制剂的报告基因系统”这种基因系统在食品加工行业中可用于解决微生物生物膜形成机制...
摘要 本发明公开了新的Ub‑Nanoluc报告基因系统和Ub‑Ub‑GS‑Nanoluc报告基因系统,以及其在去泛素化酶活性检测以及通量化筛选去泛素化酶抑制剂中的应用,所述Ub‑Nanoluc报告基因DNA序列如SEQIDNO.1所示,所述Ub‑Ub‑GS‑Nanoluc报告基因DNA序列如SEQIDNO.4所示。本发明利用荧光素酶Nanoluc高灵敏性的...
1.一种基于人nlrp6启动子的荧光素酶报告基因检测系统,其特征在于,包括n6-p-luc表达载体,所述n6-p-luc表达载体由seq id no.1所示的人nlrp6转录起始位点上游1163bp序列克隆到在空载体pgl4.20多克隆位点区域构建而成。 2.一种基于人nlrp6启动子的荧光素酶报告基因检测细胞模型,其特征在于,所述细胞模型为含有如权...