能激活和抑制基因的表达,参与不同的基因调控网络,研究调控基因表达的分子机制。因此,报告基因能检测启...
艾博思生物构建的启动子荧光素酶报告基因质粒是以pGL3、pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了启动子序列,可以高灵敏度地检测启动子的激活水平。 启动子报告基因载体有普通真核表达载体、慢病毒载体可以选用,常用的是GM-4629(pGL3-Basic)载体。 推荐使用:
启动子双荧光素酶报告基因的工作原理基于荧光素酶的催化反应。荧光素酶是一种能催化荧光素氧化并产生荧光的酶,其催化反应需要三个物质:荧光素、ATP和镁离子。在细胞内,通过对启动子的识别和结合,荧光素酶能够选择性地催化荧光素的氧化反应,从而产生荧光信号。 当启动子活性较高时,荧光素酶A和荧光素酶B均能结合到...
转录因子与启动子的结合是基因转录调控的重要事件,启动子报告基因载体可用于检测特定转录因子通过启动子上特定位点调控基因转录的检测。锐博生物pPro-RB-Report载体,海肾萤光素酶基因上游多克隆位点可用于插入目的基因的启动子,故可以海肾萤光素酶基因作为报告基因,以萤火虫萤光素酶基因作为内参基因,通过检测海肾萤光素酶...
(1)启动子结构分析:将待测启动子区域序列进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别插入LUC/GUS报告基因上游,检测其启动子的活性。 图7 启动子结构分析。 (2)启动子SNP分析:一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性,将待测启动子插入FLuc报告基因上游,检测萤光素酶活性,从而判断这些启动子的相对活性。
(多选)报告基因( )。 A. 能用于检测启动子的活性 B. 以其易于分析的编码序列代替感兴趣基因的编码序列 C. 能用于确定启动子何时何处有活性 D. 以其易于分析的
转录因子结合至启动子区域,并改变其启动子功能的强弱,便可引起下游报告基因Fluc转录水平发生变化,进而影响其蛋白翻译,最终底物与荧光素酶反应发生变化,荧光强弱发生改变,最终达成互作功能验证。1)验证转录因子与启动子是否有互作(转录因子过表达载体TF、过表达空载TF-空载)表3. 启动子和转录因子结合验证双荧光素...
1、基因表达的启动:启动子是否被启动,表达; 2、RNA水平的修饰:RNA剪接;RNA的转运;RNA稳定性(比如miRNA或者LncRNA特定情况下对mRNA的调控); 3、蛋白水平的调节:翻译抑制,蛋白稳定性与酶解。 其中,基因的本底表达启动无疑是最为关键且信号最为强烈的一环,基因的本底表达取决于启动子的活性,因此,不同启动子的活性...
报告基因检测启动子活性汇报人:<XXX>2024-01-16contents目录引言基因检测启动子活性概述实验设计与方法结果分析与讨论报告总结与建议01引言 目的和背景了解基因表达调控机制启动子是基因表达的关键调控元件,研究其活性有助于深入了解基因表达的调控机制。指导基因工程操作通过报告基因检测启动子活性,可以为基因工程操作提供指...
使用“启动子-报告基因-终止子”的载体构建方式,适用的转化系统有原生质体转化系统、基因枪轰击或农杆菌介导的瞬时表达系统以及转基因植物的稳定表达系统等。最常用的是以GUS作为报告基因来进行启动子分析实验。GUS基因表达的产物为β-葡萄糖昔酸酶,属水解酶类,在适宜的条件下,该酶可将5-溴-4-氯-3-吲哚-β-...