艾博思生物构建的启动子荧光素酶报告基因质粒是以pGL3、pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了启动子序列,可以高灵敏度地检测启动子的激活水平。 启动子报告基因载体有普通真核表达载体、慢病毒载体可以选用,常用的是GM-4629(pGL3-Basic)载体。 推荐使用:
启动子基因报告真核细胞基因表达目的构建双启动子双报告基因真核表达质粒,并在293T细胞内进行表达。方法分别以pEGFP-N1和pDsRed-N1为模板,PCR扩增EGFP和DsRed基因,插入表达载体pCI中,分别构建重组表达质粒pCI-EGFP和pCI-DsRed,利用载体上BglⅡ和BamHⅠ为同尾酶的特点,将两个表达质粒酶切后拼接,构建双启动子双报告基...
方法构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒,以含pGL3-EPO-α-MHC和pGL3-CMV启动子的质粒分别转染缺氧和常氧的心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶的表达。结果pGL3-CMV启动子质粒在缺氧条件下的报告基因表达与常氧条件相比显著下降(P < 0.05),而pGL3-EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下能够显著上調报告基因...
方法:以人基因组DNA为模板,扩增ERCC1启动子,将其重组到荧光素酶报告基因载体pGL4 Basic中,测序验证构建的质粒中包含ERCC1启动子序列。结果:测序结果正确,质粒pGL4-ERCC1-P1构建成功。结论:人ERCC1启动子荧光素酶报告基因质粒构建成功,可以用于后续基因表达调控的研究。 [Abstract] Objective:To construct a human ...
摘要:目的构建含有人4次跨膜监视蛋白A(MS4A)基因启动子的萤火虫荧光素酶报告基因质粒。方法用PCR方法扩增获得含有人MS4A7基因启动子的DN段,将其连接至TA克隆质粒后转移至虫荧光素酶质粒pGL3-basic中,得到pGL3-MS4A7-Promoter重组质粒;经限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定得到确认;将该质粒转染进入HL-60细胞,并检测...
并于48h时收集细胞.测定荧光素酶的相对表达活性.结果(1)酶切及测序证实成功扩增FasL基因启动子并构建了带有FasL基因启动子的报告基因表达质粒:(2)皮质酮处理的Leydig细胞中FasL启动子调控的荧光素酶表达质粒的表达活性显著增高.结论构建成功的带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒可准确地评价FasL启动子在凋亡过程中的...
通过分别构建突变CArG box和SBE位点的SM22α启动子荧光素酶报告基因质粒,为研究Myocardin和Smad2基因在SM22启动子上的调控作用提供理论依据。本实验采用引物设计,PCR扩增,转化等手段构建SM22α启动子荧光素酶报告基因的点突变质粒。利用测序的方法对构建质粒进行验证。实验结果显示成功构建SM22α启动子荧光素酶报告基因的...
目的:从人基因组中克隆SOD2基因的启动子并插入到荧光素酶报告基因载体中并进行基因测序鉴定。方法:以人基因组DNA为模板,用PCR的方法扩增出人SOD2基因启动子片段后,将其插入到pGL3-basic载体的荧光素酶报告基因上游,将构建...
PSA启动子雄激素应答元件报告基因质粒AREs-Luc的构建.pdf,书面交流 中华医学会男科学分会第十二次全国男科学术会议论文汇编 蛋白表达水平的提高。 结论miRNA-21阳性率与前列腺癌患者根治术后的预后相关,并且可以作为一个独立的因素来预测 腺癌的治疗方面有潜在的临床应用价
目的 构建人表面活性物质蛋白-B (SP-B)基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒,并分析其在H441细胞中的转录活性.方法 (1)以人基因组DNA为模板,PCR扩增SP-B启动子(-218/+435 bp)序列片段,并通过TA克隆方法连接到pGM-T载体上,筛选阳性克隆将目的片段进行测序.测序鉴定正确后的目的片段被克隆到荧光素酶表达载体...