自1990年萤光素酶生物传感器技术诞生,时至今日,萤光素酶报告基因的检测系统被广泛应用于细胞信号通路、siRNA/miRNA、免疫应答、药物筛选等研究。萤光素酶报告基因检测系统中具有代表性的是萤火虫萤光素酶报告基因和海肾萤光素酶报告基因,由于两种酶底物和发光颜色的区别,且在动物体内无内源性表达,使其在单、双报告实验...
在双荧光素酶检测中，一般情况下海肾荧光素酶基因作为内参使用，将带有海肾荧光素酶基因的质粒与报告基...
双荧光素酶报告基因检测系统是以荧光素为底物来检测荧光素酶活性，通过荧光测定仪检测释放的生物荧光，从而反映基因是否存在靶向互作的检测系统。在以萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, 简称F-Luc）为报告基因的基础上，引入了海肾荧光素酶（Renilla luciferase, 简称R-Luc）作为内参基因，可排除组间质粒转染细胞时转...
双荧光素酶的基本原理:荧光素酶(Luciferase)是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称,来自于自然界能够发光的生物。双荧光素酶通常是指萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)是从甲虫中分离得到,分子量为61 kDa;海肾荧光素酶(Renilla Luciferase)...
双荧光素酶报告基因检测系统-promega 下载积分: 800 内容提示: Dual-Luciferase ® Reporter Assay 试剂准备 Luciferase Assay Buffer II 10ml Luciferase Assay Substrate 1vial Stop & Glo® Buffer 10ml Stop & Glo® Substrate, 50X 200ul Passive Lysis Buffer (PLB), 5X 30ml 1. 1X PLB: 加1体积...
报告基因检测流程主要有4个模块：分别是质粒构建、细胞转染、报告基因检测和数据分析。质粒构建 双萤光素酶报告基因系统一般将萤火虫萤光素酶报告基因质粒和海肾萤光素酶报告基因质粒共转染细胞，或将这两个报告基因构建到同一个骨架质粒上（如pGL4质粒），分别用不同的启动子启动其表达。◆ 主报告基因载体的选择根据...
1) 什么是双荧光素酶报告基因测试系统(DLR)? DLR 测试系统灵敏,方便,在一个系统中用于测量两个单独的荧光素酶报告基因,萤火虫荧光素酶及海洋海肾荧光素酶 (Renilla reniformis) ,DLR测试系统可用于细胞裂解物及无细胞的翻译系统。 2) 有哪些海肾荧光素酶载体? 海肾荧光素酶载体pRL用于在转染的哺乳细胞中组...
双荧光素酶报告基因检测系统，以荧光素酶活性检测为原理，结合萤火虫荧光素酶与海肾荧光素酶，形成双系统检测，确保实验结果准确可靠。此系统广泛应用于细胞生物学研究，如启动子活性验证、转录因子互作检测及基因表达分析等。实验原理核心在于，构建报告基因质粒，通过细胞转染与裂解后，经荧光测定仪检测生物...
双荧光素酶报告基因系统的应用场景广泛。例如，在启动子与转录因子互作检测中，将靶启动子片段插入到萤火虫荧光素酶表达序列上游，构建实验报告基因质粒，与要检测的转录因子表达质粒共转染相关细胞。通过检测荧光强度判断转录因子是否与该启动子存在相互作用。若转录因子能够激活靶启动子，则萤火虫荧光素酶的...
基于荧光素酶(luciferase)的发光原理,科学家发明了双荧光素酶报告基因检测系统。该系统包括萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和海肾荧光素酶(Renilla luciferase)。两者可催化各自的底物发生氧化作用产生生物荧光,产生的荧光数值大小即表示了两种酶的表达量多少。其通常以萤火虫荧光素酶为报告基因,以海肾荧光素酶为内参...