慢病毒载体(Lentiviral vectors, LVs)是在人免疫缺陷病毒(HIV-1病毒)基础上改造而成的病毒载体系统,它能高效的将目的基因(或RNAi)导入动物和人的原代细胞或细胞系,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。 慢病毒载体基因组是单股正链RNA,其基因组进入细胞后,在细胞浆中被其自身携带的反转录酶反转为DNA,形成DNA整...
对于重组慢病毒的包装系统、重组慢病毒产品以及转导生成的改造后细胞治疗产品均需要通过感染性实验和分子分析等检定复制型慢病毒的可能(图4)。 图4 复制型慢病毒检定要求 复制型慢病毒的检定要求 复制型慢病毒的检测一般推荐采用感染法测定。根据2020 FDA...
使用吉满生物提供STAT3过表达慢病毒感染MLE12细胞，并进行OGD/R诱导，发现STAT3过表达后，SLC7A使用吉满生物提供sh-TRIM44和TRIM44过表达慢病毒分别感染A2058和A375细胞，经RT-qPCR和western Blot验证：sh-TRIM44感染后，目的基因表达量显著降低；感染TRIM44过表达慢病毒后，目的基因的表达量显著上调；(Cancer Med. 2...
3. 于转染后48h和72h两次收毒，提高病毒的量；4. 和元生物针对编码基因，非编码基因导致的出毒异常，专门开发了已授权的专利——Vpack慢病毒包装系统，解决病毒不出毒, 滴度低的问题。和元生物●慢病毒的滴度检测 滴度：即单位体积中有感染能力的病毒数目，单位TU/mL，是活性滴度单位，主要是指能够感染并进入...
MOI=（病毒滴度x病毒体积）/细胞数目 2、如何确定向细胞中加入慢病毒的最佳时间？慢病毒感染细胞后2~3天可观察慢病毒携带的基因荧光表达情况，在细胞汇合度30~50%且细胞状态良好时加入慢病毒，确保在感染后2天时细胞增长达到70%左右的汇合度。3、用于慢病毒感染的细胞接种量是多少？根据细胞增殖的速度调整细胞接种...
三、慢病毒包装应用 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1病毒为基础发展起来的基因研究载体,与传统的逆转录病毒载体相比,慢病毒载体具有在分裂和非分裂细胞中感染的能力。 实验平台的慢病毒系统属于第三代慢病毒系统,具有高生物安全性,采用VSVG包膜,宿主范围广泛,病毒滴度高,达到10^9TU/mL。
二、慢病毒包装的原理携带外源基因的慢病毒载体与包装载体一同转染包装细胞，即可进行病毒的包装。包装好之后分泌到细胞外的培养基中，经过离心取得上清液，再浓缩后的慢病毒液可以直接用于宿主细胞的感染，目的基因进入到宿主细胞之后，经过逆转录，整合到细胞基因组，从而实现外源基因在宿主细胞中的表达。图2 慢病毒包装...
图1HIV-1慢病毒的结构 慢病毒载体系统由两部分组成，即包装成分和载体成分。慢病毒载体成分包括了包装、转染、稳定整合所需要的全部遗传信息。慢病毒包装成分可提供转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的辅助蛋白。慢病毒载体要避免产生具有自我复制能力的病毒（replication competent virus, RCV）。慢病毒载体系统的...
1.什么是慢病毒 慢病毒的英文是Lentivirus,它的命名有两层意思,一方面Lenti-在拉丁文中有慢的意思;另一方面慢病毒感染患者早期很难观察,大多都会经历一个长达数年的潜伏期,之后会缓慢发病,因此这些病原微生物被称之为慢病毒。它是逆转录病毒科下的一个属,其主要...