以下是一些常见的感受态细胞类型及其特点,帮助你做出最佳选择: DH5a 🏅 DH5a是实验室常用的感受态细胞,转化效率高,特别适合用于蓝白斑筛选。 T0P10 🌀 T0P10是常规实验用的克隆感受态细胞,生长速度快,转化效率高,同样适用于蓝白斑筛选。 JM109 🔬 JM109是提取高质量DNA的理想菌株,非常适合用于构建克隆和蓝白斑筛...
1)化学感受态细胞转化的第一步,加入DNA轻轻混匀后,冰上静置:①DNA和细菌细胞膜均为负电荷,会有电荷间的排斥作用。混匀静置时,Ca2+与外源DNA结合中和DNA的负电荷,Ca2+与细菌细胞膜结合中和细胞膜的负电荷,克服了外来DNA和细菌细胞膜之间的负电荷排斥作用。②Ca2+与DNA和细菌细胞膜脂多糖的磷酸盐形成配位络合物黏附...
感受态细胞(competent cell)是通过理化方法( CaCl2,RuCl等化学试剂法)诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大,直观的说,使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。 实验中常用到各种细菌感受态,...
一、常用感受态细胞的用途及特征 二、大肠杆菌感受态细胞部分基因符号及意义 三、达科为感受态细胞产品一览图 LGC(Biosearch)提供高效(≥4×1010cfu/μg)电转感受态细胞,适用于噬菌体文库构建、复杂文库构建等;碧云天提供实验室多种常规化转感受态细胞,超高性价比!达科为提供感受...
感受态细胞1.1每支来自喀斯玛锐竞,提供100μl/支,适用于多种菌种,包括DH5α、Top10、JM109、Stbl3和BL21等。选择合适的感受态细胞对于基因克隆实验至关重要,以下是详细的使用感受和步骤:🔍 选择适宜的感受态细胞:根据序列的结构、长度、载体种类以及特殊要求等,选择合适的感受态细胞。例如,DH5α和TOP10适用于蓝白...
1. 取 100μl 感受态细胞于冰浴上融化。2. 加入 1μl 纯质粒或连接产物,轻轻吹打混匀,冰...
制备感受态细胞需要选择用A.潜伏期的大肠杆菌B.平衡期的大肠杆菌C.衰亡期的大肠杆菌D.对数生长期的大肠杆菌
在《“转化”成功的关键——感受态细胞的选择(上篇)》课程中,大家跟随Dr赛深入学习了什么是转化,以及在转化实验中困扰大家最多的感受态细胞选择问题,我们在选择感受态细胞时主要考虑三要素:基因型、转化效率和转化方法,相信大家已经掌握了基本的感受态细胞选择技能。
查文献,没说的根据自己的基因性质来预测,最后先上常规的试试,不行再换菌株。又不是考试,实验是...
电转感受态细胞:108,109,1010cfu 常规的克隆根据连接产物和质粒的量选择适当效价的感受态细胞,特殊转化(如建库)则选择最高效价的感受态细胞,一般选用电转。 ν感受态细胞效价测定 标准质粒:pUC18, pUC19,pBR322 超螺旋,超纯 质粒使用量:<5μl, <1ng