以下是一些常见的感受态细胞类型及其特点,帮助你做出最佳选择: DH5a 🏅 DH5a是实验室常用的感受态细胞,转化效率高,特别适合用于蓝白斑筛选。 T0P10 🌀 T0P10是常规实验用的克隆感受态细胞,生长速度快,转化效率高,同样适用于蓝白斑筛选。 JM109 🔬 JM109是提取高质量DNA的理想菌株,非常适合用于构建克隆和蓝白斑筛...
1)化学感受态细胞转化的第一步,加入DNA轻轻混匀后,冰上静置:①DNA和细菌细胞膜均为负电荷,会有电荷间的排斥作用。混匀静置时,Ca2+与外源DNA结合中和DNA的负电荷,Ca2+与细菌细胞膜结合中和细胞膜的负电荷,克服了外来DNA和细菌细胞膜之间的负电荷排斥作用。②Ca2+与DNA和细菌细胞膜脂多糖的磷酸盐形成配位络合物黏附...
leu2-3,报告基因为:HIS3,ADE2和 lacZ,第一步通过营养缺陷型报告基因 (HIS3,ADE2)进行选择性生长筛选,进一步通过LacZ报告基因进行β-半乳糖分析显色的定量或半定量筛选,三个独立的报告基因,受不同启动子的调控,降低假阳性几率。
二、大肠杆菌感受态细胞部分基因符号及意义 三、达科为感受态细胞产品一览图 LGC(Biosearch)提供高效(≥4×1010cfu/μg)电转感受态细胞,适用于噬菌体文库构建、复杂文库构建等;碧云天提供实验室多种常规化转感受态细胞,超高性价比!达科为提供感受态细胞全冷链运输,热卖感受态细胞更...
1. 取 100μl 感受态细胞于冰浴上融化。2. 加入 1μl 纯质粒或连接产物,轻轻吹打混匀,冰...
对于低通量的细菌转化,单管包装的化学感受态细胞可以直接进行热激,可避免因反复冻融造成的转化效率降低。对于中通量的细菌转化,可选择预装入联管中的感受态细胞,再借助多通道移液器进行转化。对于高通量细菌转化,选择预装入96孔板的感受态细胞,可实现模块化孵育,甚至可兼容自动化。
进入受体细胞的DNA分子通过复制和表达,实现遗传信息转移,使受体细胞获得新的遗传性状。转化后的细胞在筛选培养基中培养,可筛选出转化子。化学转化操作步骤如下:取100μL冰上融化的感受态细胞,加入目的DNA,轻柔混匀,冰上静置30分钟。 42°C水浴热激45秒,随后迅速冰上静置2分钟。 向离心管中...
选择感受态细胞,就像挑选一把精准的手术刀,每一款都有其独特的特性,适用于不同的手术场景。了解并掌握它们,你就能在基因工程的舞台上自如挥洒,创造出无尽可能。持续探索,感受态的无限可能 基因世界中的小知识无尽,感受态细胞的选择只是开始。随着科学的进步,新的感受态技术不断涌现,为基因操作提供了...
选择合适的感受态细胞是实验成功的关键,它们通过物理化学手段如CaCl2诱导,让细胞进入吸收DNA的理想状态。细胞膜的临时通透性变化,便于外来基因融入。实验中常见的感受态类型有大肠杆菌克隆感受态、表达感受态等,每种适用于不同的实验需求。感受态转化方式分为化学转化(热激)和电转。化学转化主要应用于大肠...
选择合适的感受态细胞对于基因工程操作至关重要。这些细胞通过特定的处理手段如CaCl2或RuCl等,暂时改变其细胞膜特性,形成利于接纳外来DNA的孔洞。常见的感受态细胞类型包括大肠杆菌克隆感受态和表达感受态,以及本文重点介绍的农杆菌感受态。农杆菌因其在双子叶植物伤口处的侵染能力和高转化效率,成为植物遗传转化...