在实验室中,选择合适的感受态细胞至关重要,它们能够影响实验的效率和结果。以下是一些常见的感受态细胞类型及其特点,帮助你做出最佳选择: DH5a 🏅 DH5a是实验室常用的感受态细胞,转化效率高,特别适合用于蓝白斑筛选。 T0P10 🌀 T0P10是常规实验用的克隆感受态细胞,生长速度快,转化效率高,同样适用于蓝白斑筛选。 JM...
感受态细胞(competent cell)是通过理化方法( CaCl2,RuCl等化学试剂法)诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大,直观的说,使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。 实验中常用到各种细菌感受态,...
二、大肠杆菌感受态细胞部分基因符号及意义 三、达科为感受态细胞产品一览图 LGC(Biosearch)提供高效(≥4×1010cfu/μg)电转感受态细胞,适用于噬菌体文库构建、复杂文库构建等;碧云天提供实验室多种常规化转感受态细胞,超高性价比!达科为提供感受态细胞全冷链运输,热卖感受态细胞更...
1. 取 100μl 感受态细胞于冰浴上融化。2. 加入 1μl 纯质粒或连接产物,轻轻吹打混匀,冰...
对于低通量的细菌转化,单管包装的化学感受态细胞可以直接进行热激,可避免因反复冻融造成的转化效率降低。对于中通量的细菌转化,可选择预装入联管中的感受态细胞,再借助多通道移液器进行转化。对于高通量细菌转化,选择预装入96孔板的感受态细胞,可实现模块化孵育,甚至可兼容自动化。
感受态细胞(competent cell)是通过特定化学方法诱导细胞,使其具备最佳能力吸收和容纳外来DNA的生理状态。这一过程通过增大细胞膜通透性来实现,具体表现为细胞膜表面形成能允许外源基因或载体进入的孔洞,随后细胞自身会修复这些孔洞。实验中广泛使用各种细菌感受态,根据用途,大致分为大肠杆菌克隆感受态、大肠杆菌...
操作步骤包括:先取感受态细胞与DNA混合,42°C热激后迅速冷却,再复苏于无菌培养基中,最后筛选出转化子。例如,Genesand Efficom 5α的操作指南提供了常规和快速转化流程,分别针对不同抗性质粒的转化需求。化学转化中,关键步骤解释如下:静置让Ca2+与DNA和细胞膜结合,克服排斥;热激打开细胞膜孔隙;...
选择感受态细胞,就像挑选一把精准的手术刀,每一款都有其独特的特性,适用于不同的手术场景。了解并掌握它们,你就能在基因工程的舞台上自如挥洒,创造出无尽可能。持续探索,感受态的无限可能 基因世界中的小知识无尽,感受态细胞的选择只是开始。随着科学的进步,新的感受态技术不断涌现,为基因操作提供了...
选择合适的感受态细胞对于基因工程操作至关重要。这些细胞通过特定的处理手段如CaCl2或RuCl等,暂时改变其细胞膜特性,形成利于接纳外来DNA的孔洞。常见的感受态细胞类型包括大肠杆菌克隆感受态和表达感受态,以及本文重点介绍的农杆菌感受态。农杆菌因其在双子叶植物伤口处的侵染能力和高转化效率,成为植物遗传转化...
感受态转化方式 选择感受态细胞时,转化方式是需要考虑的重要因素之一。转化方式分为化转(热激)和电转两种,对应的感受态细胞即为化学感受态细胞(Chemically Competent Cell)和电转感受态细胞(Electroporation-Competent Cell)。选择哪种转化方式取决于实验所需的转化效率、所转化质粒DNA的类型、数量及复杂度等。