实时荧光定量逆转录PCR(Real-time RT-PCR)是一种结合了逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光PCR(qPCR)的技术。它通过将mRNA或总RNA逆转录为cDNA,然后以cDNA为模板进行实时荧光PCR分析,从而实现定量检测基因表达水平。一、背景知识介绍 Real-time RT-PCR中的“RT”代表reverse transcription(逆转录),即利用mRNA或总RNA为模...
2. miRNA加尾法逆转录+通用荧光定量PCR ①逆转录(RT): 将提取的RNA按照试剂盒的体系配置好,该步骤我们只需提供RNA,其余逆转录引物、逆转录酶以及dNTPs包含在Mix中。一管内即可逆转录多个miRNA的cDNA。 ②荧光定量(qPCR):使用通用荧光定量试剂盒 加尾法的上游引物(正向引物)设计: 例如hsa-miR-30b-5p的成熟序列为...
逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)是一种基于荧光信号实时检测PCR扩增产物的技术,主要用于研究基因表达水平。RT-qPCR技术通常分为两部分,第一部分是逆转录反应(Reverse Transcription,RT),将RNA转录成cDNA;第二部分是PCR扩增反应,通过引物特异性扩增目标基因的cDNA,并结合荧光探针或荧光染料进行荧光信号检测。荧光信号的强度与...
对于qRT-PCR称呼有不同的形式,但总体上来说,实时定量反转录聚合酶链式反应(Real-Time Quantitative Reverse Transcription PCR)可能精细一些,毕竟qPCR仪器在采集数据的时候就是一种实时荧光数据收集,当然并不否认定量逆转录聚合酶链反应的称呼是错误的。 1.1 cDNA cDNA是一种由mRNA逆转录而来的DNA(有单/双链两种情况)...
逆转录反应是将RNA转录成cDNA的过程,这是进行荧光定量PCR的第一步。逆转录反应的时间取决于所用逆转录酶的活性和效率,通常情况下,逆转录反应需要1-2小时不等。 3. PCR扩增 PCR扩增是将cDNA进行放大的过程,用来产生充足的模板用于后续的检测和定量。PCR的扩增时间取决于模板的丰度和所用PCR酶的效率,通常情况下,PC...
逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。它是一种以 RNA 为样本,RNA链被逆转录成为互补DNA(cDNA),再以…
🚀🚀🚀 1、使用5xA1l-in-One Reaction Mix for gPCR和TransScrip Uni All-in-One Enzyme Mix,仅需5分钟即可高效地将RNA合成第一链CDNA,同时去除基因组DNA。操作简便,降低操作过程中的污染机率。🌐🌐🌐 2、利用PerfectStart®Green qPCR SuperMix进行扩增,其扩增效率强,特异性高,灵敏度好,数据准确。
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse transcription(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。与RT-PCR一样,RT-qPCR定量分析...
产品名称 逆转录酶(reversetranscriptase)PERT荧光定量PCR检测试剂盒 产品规格 20次 有效成分含量 99% 是否进口 否 用途范围 仅用于科学实验研究使用 包装规格 盒装kg 检测方法 比色法 样本 组织,细胞,线粒体,细菌等 保质期 6个月 产地 上海 储存条件 冷藏或-20℃ 价格 客服报价为准 运输 快递...
2-4实时定量逆转录PCR技术