(三)RNA 逆转录为 cDNA 1.去除基因组 DNA 反应 (1)在 RNase-free 离心管中按照下表配制 10mμL 体系(以 Takara 试剂盒 Prime Script™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time),SYBR Green Ⅰ法为例)。 试剂 使用量 5×gDNA Eraser Buffer Buffer 2.0 μl gDNA Eraser Total RNA 2μ...
首先,通过逆转录酶将RNA转录成cDNA(反转录过程),然后使用DNA聚合酶扩增cDNA。通过纳米量热法分析PCR反应几率,可以定量分析样品中RNA的表达水平。 qRT-PCR技术具有高灵敏度,高特异性和较高的准确性。与传统的聚合酶链反应(PCR)相比,qRT-PCR技术可以在更短的时间内得到更加准确的结果。此外,它的操作简化了DNA净化和...
定量逆转录聚合酶链反应(Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction),也称为RT-qPCR,用于检测和定量RNA。在qPCR中,扩增产物的数量在每个PCR反应周期使用荧光值被测量。利用的底物或者模板是cDNA (complementary DNA, cDNA),而cDNA是Total RNA(总RNA)或mRNA首先转录合成。然后将cDNA用作qPCR或实时PCR反...
酶联夹心杂交法定量检测IL-6mRNA逆转录-聚合酶链反应白细胞介素-6核糖核酸目的:建立一支高灵敏度、高特异性、精确、简便的逆转录-聚合酶链反应-微孔板酶联夹心杂交技术定量检测人IL-6mRNA的方法。方法:从人外周静脉血单个核细胞提取总RNA,进行RT-PCR扩增,PCR产物经热变性后与检测探针一起加入已包被捕获探针的微孔...
实时荧光定量逆转录一聚合酶链反应 (RT 姜红涛姚秀林抚顺市疾病预防控制中心，辽宁抚顺113006目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的差异。方法采用实时荧光定...
建立实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ一PCR) 检测慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因的方法,为CML临床诊断及微小残留病(MRD) 监测提 供重要诊断依据。 方法 采用传统的逆转录聚合酶链反应(RT一PCR) 扩增K562细胞管家基因 GUS及融合基因bcr/abl,以梯度稀释的扩增产物为标准品构建标准曲线,建立 ...
4.传染病常通过核酸测试诊断。然而,最广泛实践的核酸扩增方法聚合酶链式反应(pcr)或定量或实时pcr(qpcr或rt ‑ pcr)既耗时又耗能。rna的检测对于临床诊断,尤其是对于病毒感染也可为必不可少的,但是rna不能通过pcr直接扩增。它需要第一逆转录步骤,在该第一逆转录步骤中称为逆转录酶的酶酶促地从rna模板制造dna...
第八、九章:中国定量逆转录聚合酶链反应各细分类型与定量逆转录聚合酶链反应在各细分应用领域的市场销售量、销售额及增长率预测; 第十章:宏观经济形势、政策走向与可预见风险分析; 第十一、十二章:中国定量逆转录聚合酶链反应市场规模预测、挑战与机遇、问题及发展建议。
目的比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,RT-PCR法及细胞培养法检测甲3型流行性感冒(流感)病毒的灵敏度与特异性.方法采用建立的实时荧光定量RT-PCR,RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离等3种方法,同时对流感监测点送检的60份疑似流感标本检测甲3型流感病毒.结果细胞病毒分离的阳性数为10份,RT-PCR与...