real-time RT-PCR的中文名称是实时逆转录聚合酶链反应,是一种结合了逆转录(RT)和实时聚合酶链式反应(qPCR)的技术,用于从RNA样本中合成相应的cDNA,并在逆转录的同时实时监测和定量扩增特定的RNA序列。 应用: 实时RT-PCR常用于研究基因表达的定量水平、检测和定量RNA病毒、评估病原体感染等。它可以提供实时、定量的...
4)逆转录:1ul茎环引物(stem-loop)+试剂盒中逆转录MIX(2ul+2ul)+free-RNase H2O(5ul)(to 20 ul) 5)一般来说,一次逆转录只能进行一个miRNA的单独逆转录,但是根据实际情况而言,我们可以将miRNA+内参U6混合在一管中一同逆转成cDNA。 根据以上试剂盒设计的加样量,我尝试过一管内混合逆转录内参+5个miRNA,其...
4)逆转录:1ul茎环引物(stem-loop)+试剂盒中逆转录MIX(2ul+2ul)+free-RNase H2O(5ul)(to 20 ul) 5)一般来说,一次逆转录只能进行一个miRNA的单独逆转录,但是根据实际情况而言,我们可以将miRNA+内参U6混合在一管中一同逆转成cDNA。 根据以上试剂盒设计的加样量,我尝试过一管内混合逆转录内参+5个miRNA,其...
4)逆转录:1ul茎环引物(stem-loop)+试剂盒中逆转录MIX(2ul+2ul)+free-RNase H2O(5ul)(to 20 ul) 5)一般来说,一次逆转录只能进行一个miRNA的单独逆转录,但是根据实际情况而言,我们可以将miRNA+内参U6混合在一管中一同逆转成cDNA。 根据以上试剂盒设计的加样量,我尝试过一管内混合逆转录内参+5个miRNA,其...
microRNA(miRNA)是一种长度约为19-25nt单链RNA,一般参与转录后调节基因表达。作为非编码RNA(ncRNA),目前大量的研究显示一些差异表达miRNA在众多的疾病中扮演着重要的角色,而了解miRNA差异表达,荧光定量PCR是最基础、应用最多的检测和定量miRNA的方法。 由于miRNA的长度比较短,因此传统的荧光定量并不适用,下面介绍的两...
microRNA(miRNA)是一种长度约为19-25nt单链RNA,一般参与转录后调节基因表达。作为非编码RNA(ncRNA),目前大量的研究显示一些差异表达miRNA在众多的疾病中扮演着重要的角色,而了解miRNA差异表达,荧光定量PCR是最基础、应用最多的检测和定量miRNA的方法。 由于miRNA的长度比较短,因此传统的荧光定量并不适用,下面介绍的两...
miRNA的逆转录和荧光定量PCR方法 miRNA是一种长度约为19-25nt的单链RNA,通常参与转录后调节基因表达。作为非编码RNA(ncRNA),越来越多的研究表明,一些差异表达的miRNA在多种疾病中发挥着重要作用。因此,了解miRNA的差异表达情况,荧光定量PCR是最基本且应用广泛的方法。
虽然 Real-time PCR(实时荧光定量 PCR)和 Reverse transcription PCR(反转录PCR)看起来都可以缩写为 RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是:RT-PCR 特指反转录 PCR,而 Real-time PCR一般缩写为 qPCR(quantitative real-time PCR)。 real-time RT-PCR 中间的「RT」是 reverse transcription(逆转录),整个意思就是...
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