一个可能做反转录PCR的,另一个可能做实时定量荧光PCR的.反转录PCR由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚... 分析总结。 反转录pcr由一条rna单链转录为互补dnacdna称作逆转录由依赖rna的dna聚合酶逆转录...
逆转录PCR(RT-PCR)灵敏性高、操作简单点,经常用于生物学检测、基因定量分析、克隆目的基因等。 图1. 逆转录RT-PCR原理图 cDNA的合成是RT-PCR的重要环节。以mRNA为模板,在逆转录酶的催化下,随机引物、oligo(dT)或基因特异性引物的引导下合成互补的DNA( complementary DNA,cDNA),再按照普通PCR的方法用两条引物以...
反转录PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是将RNA的反转录反应和PCR反应联合应用的一种技术(图1)。 图1 影响RT-PCR的因素主要可以概括为以下几点: 1) RNA的质量 反转录必须保证实验使用的RNA质量(如图2所示):琼脂糖电泳胶图包括28S和18S两条清晰明亮的条带(真核样品),且28S/18S≈2:1,A260...
解:A、由题干信息“RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的多聚酶链式反应(PCR)相结合的技术”分析可知,RT-PCR以RNA为模板来合成DNA,故该体系应含有反转录酶,A正确; B、该体系是通过控制温度使反应在体外反复进行,不需要ATP提供能量,无需加入ATP,B错误; C、PCR操作中,当温度上升到90℃以上时,双链DNA解旋为...
虽然 Real-time PCR(实时荧光定量 PCR)和 Reverse transcription PCR(反转录PCR)看起来都可以缩写为 RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是:RT-PCR 特指反转录 PCR,而 Real-time PCR一般缩写为 qPCR(quantitative real-time PCR)。 real-time RT-PCR 中间的「RT」是 reverse transcription(逆转录),整个意思就是...
影响RT-PCR的因素主要可以概括为以下几点: 1) RNA的质量 反转录必须保证实验使用的RNA质量(如图2所示):琼脂糖电泳胶图包括28S和18S两条清晰明亮的条带(真核样品),且28S/18S≈2:1,A260/280≈2.0,泳道无弥散区、无基因组、蛋白污染等。 图2思科捷货号:AC0307,样本:玉米种子 ...
反转录PCR由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”，由依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）来完成。随后，DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成，随每个循环倍增，即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解，留下互补DNA RT-PCR可能是实时PCR(real-time PCR)，属于荧光定量...
反转录成cDNA,简写也是RT-PCR。不过和上面的不同!这个RT是reverse transcript的缩写! 其实啊,对于做表达量的实验而言,反转录PCR是荧光定量PCR... 荧光定量pcr和实时荧光定量pcr还有反转录pcr都是什么呀?有什... 反转录成cDNA,简写也是RT-PCR。不过和上面的不同!这个RT是reverse transcript的缩写! 其实啊,对于做...
RT-PCR是将RNA的反转录 (RT) 和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术(过程如下图所示),可用于检测细胞中基因表达水平,RNA病毒扩增和测序、直接克隆特定基因的相应序列。(1)RT和PCR过程中的需要添加的酶分别是___。(2)通过RT-PCR构建的基因文库叫做___文库,基因中___(有/无)启动子。(3)若利用此技术通...
RT-PCR技术是反转录-聚合酶链式反应的简称,是指将RNA的反转录和cDNA的PCR相结合的技术。如图为RT-PCR技术过程示意图。据图分析,下列说法正确的是( )A.催化①②过程的酶都是DNA聚合酶B.催化③⑤过程的酶都具有耐高温特性C.核酸酶H和③过程的作用结果相同D.④过程需要冷却至70℃左右 相关知识点: 试题来源...