StellarisTMRNA FISH---完整细胞或组织中的单个RNA分子同时进行检测、定位和定量的一项技术 Stellaris RNA FISH工作原理 多条相同荧光标记的探针结合到一条RNA靶标上产生一个显微镜下肉眼可见的荧光点。 操作简单,仅需一步杂交,一天内即可完成单分子RNA FISH检测。 可能有人会问,Stellaris探针如何保证特异性? 更低的...
单分⼦RNAFISH，荧光原位杂交新时代 基因表达研究中，单个细胞的特征常常有别于该群体的平均特征，这样的细胞异质性已经成为相关研究中不可忽视的现象。因此，近年来能够实现单分⼦⽔平RNA原位检测的 FISH（smFISH）技术备受青睐。它们能够直观的实现单个细胞中RNA的定量和亚细胞⽔平的定位。在诸多可选技术中，...
为了证实我们的结果,我们使用结构照明显微镜(SIM)进行了双IF-FISH分析。我们采用了单分子廉价的FISH (smiFISH),用一组15个hTR特异性探针检测内源性hTR,并用coilin抗体对CBs进行共染色。在hTR阳性细胞中,包括hTR5' MS2、hTRCr4/5MS2和亲本HeLa 1.3细胞中,smi FISH标记的hTR灶与CBs共定位在端粒处(图S3A和S3B)。
来自美国爱因斯坦医学院的Ulrich Steidl教授团队,利用单分子RNA荧光原位杂交(smFISH)技术测量小鼠干细胞编码转录因子的三个关键基因的转录动力学,包括PU.1,Gata1和Gata2。最终发现一些少量突发情况会导致造血干细胞和祖细胞中的拮抗转录因子共表达。同时对其谱系进行分析发现,尽管单个干细胞克隆产生的细胞处于转录的相关状态...
为了探究COOLAIR LncRNA在拟南芥FLC低温诱导的表观沉默过程中起到怎样的调控作用,英国诺里奇研究所Stefanie Rosa研究团队利用LGC Biosearch公司的单分子荧光原位杂交技术(Stellaris™ Single-molecule RNA FISH)对FLC正义转录本和反义转录本COOLAIR在细胞水平进行了亚细胞时空定位。
rna荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization(fish))是一种重要的非放射性原位杂交技术,原理是利用报告分子(如生物素、地高辛等)标记核酸探针,然后将探针与染色体或靶dna/rna杂交,若两者同源互补,即可形成靶dna/rna与核酸探针的杂交体。此时可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测...
原文: Jakub Kochan, Mateusz Wawro, and Aneta Kasza,Simultaneous detection of mRNA and protein in single cells using immunofluorescence-combined single-molecule RNA FISH,BioTechniques 59:209-221 (October 2015)
目前,实现原位单分子rna检测的方法大多都是基于荧光信号的原位成像技术,例如:单分子荧光原位杂交(smfish)、基于滚环扩增的方法和基于杂交链式反应(hcr)的方法等。这些基于荧光检测的技术都依赖于修饰了荧光染料的检测探针,然而,荧光检测容易受到光漂白等影响,且严重依赖于昂贵的荧光显微镜。通过酶促显色分析进行rna单...
■ 单细胞水平实现单拷贝级别灵敏度 ■ 针对任意RNA靶标的简单杂交分析,无放射性,无需抗体 ■ 显色(CISH)信号检测,与明场和荧光显微镜兼容 ■ 免疫组织化学(IHC)、免疫荧光学(IF)或DNA FISH分析的取代方案 主要应用领域:分子病理学、癌症研究、神经系统科学、传染疾病、生物标志物 验证、毒理学以及安全性评估。
应用:转录组水平的研究与探索一直是分子领域追逐的热点,RNA FISH检测手段是不可缺少的利器,而Stellaris RNA FISH更是提供了全新的单分子荧光原位杂交技术。 Combine Stellaris RNA FISH + IF Stellaris