RNA-FISH实验旨在确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者确定结合了荧光探针的RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。 实验材料 🧪 主要试剂 通透液(1XPBS/0.5%Triton X-100): 配置50ml通透液,加入5ml 10XPBS于40ml水中,再加入250ul Triton X-100并充分混匀。 预杂交液(3%BSA in 4XSSC...
🔬 实验原理 RNA-FISH(荧光原位杂交)是一种利用荧光标记的核酸探针与细胞内特定RNA分子杂交的技术。通过荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪观察荧光信号,可以确定杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者定位结合了荧光探针的RNA分子在染色体或其他细胞器中的位置。RNA-FISH不仅能定位长链非编码RNA(lncRNA),还能区分原...
一、原理 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种利用荧光标记的核酸片段为探针,与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,通过荧光检测系统将待测核酸在组织、细胞或染色体中的位置显示出来的技术。 如果待检测的细胞或组织切片上的靶核酸与所用的核酸探针是同源互补...
首先，我们深入探讨一下RNA-FISH的原理。荧光原位杂交技术，是一种利用荧光标记的核酸片段作为探针，与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，形成专一的核酸杂交分子，并通过荧光检测系统在显微镜下显示待测核酸的位置。如果待检测的细胞或组织切片上的目标核酸与使用的核酸探针具有同源互补性，通过变性-...
解螺旋 陪伴医生科研成长 1 RNARNA FISHFISH 实验方法实验方法 1.1. 实验原理实验原理 利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶 RNA 分子杂交分子杂交, 通过在荧光显微镜或共 聚焦激光扫描仪下观察荧光荧光信号, 来,人人文库,
RNA-FISH实验,一文搞定! 🧪 主要试剂准备 通透液(1X PBS/ 0.5% Triton X-100):将 50 ml 通透液与 5 ml 10X PBS 混合,加入 40 ml 水中,再加入 250 ul Triton X-100,充分混匀。 预杂交液(3% BSA in 4X SSC):配置 100 ml 预杂交液,加入 3 g BSA 到 100 ml 4X SSC 中,实验当天新鲜配置。
🔬继续探索RNA-FISH实验的奥秘!📌实验准备: 1️⃣ 载波片处理:用1%盐酸酒精浸泡盖玻片1小时以上,流水冲洗后用灭菌双蒸水洗5遍,无水乙醇浸泡3次,每次数分钟。之后放入60℃烤箱烘干,高压灭菌。 2️⃣ 收获细胞:分化不同时期的细胞要准备哦!📌...
1、荧光原位杂交实验(FISH)荧光原位杂交(Fluorescence itu hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是 20 世纪 80 年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、...
用细胞爬片进行 RNA FISH 检测的实验流程 1. 细胞在盖玻片上进行培养,细胞长好后用 CSK 缓冲液简单洗涤。 2. 细胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。 3. 用含有 0.5% TritonX-100,,10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 处理 10-12 min。
进入“RNA EXPRESSION OVERVIEW”部分，查看靶标RNA在各器官的表达量。将鼠标置于某目标器官的柱形图上，即可显示具体表达量等信息。此数据库以不同柱形图直观展示了基因在各类组织细胞中的表达情况。案例分析：以肝脏为例，PPIB基因表达量为737.4，超过TPM值5的界限，适合进行FISH实验。确保样本评估全面、...