RNA-FISH实验旨在确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者确定结合了荧光探针的RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。 实验材料 🧪 主要试剂 通透液(1XPBS/0.5%Triton X-100): 配置50ml通透液,加入5ml 10XPBS于40ml水中,再加入250ul Triton X-100并充分混匀。 预杂交液(3%BSA in 4XSSC...
🔬 实验原理 RNA-FISH(荧光原位杂交)是一种利用荧光标记的核酸探针与细胞内特定RNA分子杂交的技术。通过荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪观察荧光信号,可以确定杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者定位结合了荧光探针的RNA分子在染色体或其他细胞器中的位置。RNA-FISH不仅能定位长链非编码RNA(lncRNA),还能区分原...
一、原理 荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种利用荧光标记的核酸片段为探针,与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,通过荧光检测系统将待测核酸在组织、细胞或染色体中的位置显示出来的技术。 如果待检测的细胞或组织切片上的靶核酸与所用的核酸探针是同源互补...
首先，我们深入探讨一下RNA-FISH的原理。荧光原位杂交技术，是一种利用荧光标记的核酸片段作为探针，与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，形成专一的核酸杂交分子，并通过荧光检测系统在显微镜下显示待测核酸的位置。如果待检测的细胞或组织切片上的目标核酸与使用的核酸探针具有同源互补性，通过变性-...
解螺旋 陪伴医生科研成长 1 RNARNA FISHFISH 实验方法实验方法 1.1. 实验原理实验原理 利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶 RNA 分子杂交分子杂交, 通过在荧光显微镜或共 聚焦激光扫描仪下观察荧光荧光信号, 来,人人文库,
RNA-FISH实验,一文搞定! 🧪 主要试剂准备 通透液(1X PBS/ 0.5% Triton X-100):将 50 ml 通透液与 5 ml 10X PBS 混合,加入 40 ml 水中,再加入 250 ul Triton X-100,充分混匀。 预杂交液(3% BSA in 4X SSC):配置 100 ml 预杂交液,加入 3 g BSA 到 100 ml 4X SSC 中,实验当天新鲜配置。
🔬 RNA核/胞浆分离的实验步骤通常包括: 细胞裂解:使用特定裂解缓冲液裂解细胞,分离细胞质和细胞核。 RNA提取:分别从细胞质和细胞核提取物中提取RNA。 验证纯度:通过PCR或qPCR等方法检测提取的RNA,确保核/胞浆分离的有效性。🔬 荧光原位杂交(FISH)实验是一种检测和定位特定核酸序列在细胞或组织样本中的方法。
01 RNA FISH基本原理 RNA FISH原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测RNA在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。
1、荧光原位杂交实验(FISH)荧光原位杂交(Fluorescence itu hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是 20 世纪 80 年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、...
用细胞爬片进行 RNA FISH 检测的实验流程 1. 细胞在盖玻片上进行培养,细胞长好后用 CSK 缓冲液简单洗涤。 2. 细胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。 3. 用含有 0.5% TritonX-100,,10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 处理 10-12 min。