🔬 实验原理 RNA-FISH(荧光原位杂交)是一种利用荧光标记的核酸探针与细胞内特定RNA分子杂交的技术。通过荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪观察荧光信号,可以确定杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布,或者定位结合了荧光探针的RNA分子在染色体或其他细胞器中的位置。RNA-FISH不仅能定位长链非编码RNA(lncRNA),还能区分原...
RNA鱼的原理是基于互补配对的作用。在进行RNA鱼实验时,首先需要设计和合成一系列特定的探针。这些探针可以与感兴趣的RNA序列相互配对,形成一个稳定的复合体。探针通常包含了标记物,例如荧光染料或辐射性同位素,这有助于观察和检测RNA的位置和分布。 一旦探针与RNA目标序列结合,实验者可以使用不同的方法来检测标记物的...
mirna rnafish原理是荧光原位杂交技术。这是一种利用荧光标记的核酸片段为探针,与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,通过荧光检测系统将待测核酸在组织、细胞或染色体中的位置显示出来的技术。如果待检测的细胞或组织切片上的靶核酸与所用的核酸探针是同源互补的,二者经变性-退火-复性...
RNA FISH不单可以定位lncRNA,还增加了区分原始和成熟lncRNA转录物的能力,并由此得以将作用位点与合成位点分开,可在转录事件和成熟lncRNA的位置和耐久性之间添加时间空间信息,是lncRNA分析的有用工具。 RNA的荧光原位杂交(FISH)长期以来一直是用于检测和定位RNA的不可或缺的工具,是其他基因表达分析方法重要的补充。觉得...
FISH、smFISH、RNAscope、STARmap作为现代分子生物学领域中用于可视化RNA分子定位的技术，它们各自有着独特的原理和发展历程。FISH（Fluorescence In Situ Hybridization）技术是利用荧光标记的寡核苷酸探针与样品中的特定DNA或RNA序列结合，通过显微镜观察实现目标分子定位的一种方法。它主要用于基因表达的检测和...
FISH技术允许科学家们通过将标记的探针与特定的RNA序列结合，直接在组织切片或细胞中可视化特定的RNA分子。然而，这种传统方法在区分单个RNA分子时存在局限性。随后，smFISH技术的出现解决了这一问题。它使用单分子检测方法，通过设计特异性荧光标记的探针，使得科学家能够精确地检测和定位单个RNA分子的位置。
RNAscope Fish技术的核心原理是通过将RNA探针与目标RNA发生特异性的杂交反应。这里所使用的RNA探针通常是经过设计和修饰的人工合成探针。 在杂交反应中,RNA探针与目标RNA的互补部分结合,形成稳定的探针-RNA复合物。这种互补结合可以使得目标RNA在细胞中被选择性地标记和可视化。 为了增强信号和提高探针-RNA复合物的稳定性...
DOI先放这里,有时间再更中文理解,等不及的可以先看文章和图片 Illuminating RNA biology through imagingPhuong Le, Noorsher Ahmed & Gene W. Yeo Nature Cell Biology volume 24, pages815–824 (2022)DOI…
荧光原位杂交 FISH的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记,然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上,再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析. ...