分子伴侣共同表达目的研究共同表达分子伴侣能否提高结核分枝杆菌编码基因的表达效率及被表达蛋白的生物活性。方法将携带有结核分枝杆菌编码基因的表达质粒Rv3790::pET16b、Rv3791::pET16b与能够同时表达3个分子伴侣DnaK、DnaJ和GrpE的质粒pkJE7共同在大肠埃希菌BL21(DE3)表达,之后对所获得的蛋白通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和...
GrpE作为二者的辅助因子,可以 辅助正确折叠蛋白的释放。Trigger factor是一个三亚基蛋白,可以与新生肽链结合,辅助 蛋白折叠。另外,不同的伴侣蛋白间也存在协同作用。在大肠杆菌中共表达分子伴侣蛋白可 以辅助外源蛋白的折叠,提高目的蛋白酶活水平,如trigger factor的引入促进小鼠内皮 抑制素、人体氧调节蛋白的溶解程度。
摘要 本发明公开了一种共表达分子伴侣蛋白提高重组大肠杆菌中1,2,4‑丁三醇产量的方法,属于遗传工程领域。本发明是以重组大肠杆菌E.coli(pEtac‑mdlC‑tac‑xdh)作为出发菌株,通过共表达分子伴侣蛋白,辅助1,2,4‑丁三醇合成途径中关键酶的折叠,增强关键酶活性,从而提高1,2,4‑丁三醇产量的...
6.本发明的第一个目的是提供一种共表达分子伴侣蛋白生产α-乳白蛋白的菌株,该菌株表达了氨基酸序列如seq id no.1所示的人α-乳白蛋白、氨基酸序列如seq id no.2所 示的α-factor信号肽和分子伴侣蛋白,所述分子伴侣蛋白选自内质网氧化还原酶1ero1、atf/creb1同源蛋白hac1、重连结合蛋白bip、内质网到高尔基体的转运...
本发明涉及一种共表达分子伴侣蛋白生产α‑乳白蛋白的菌株及其应用,该菌株表达了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的人α‑乳白蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的α‑factor信号肽和分子伴侣蛋白,分子伴侣蛋白选自内质网氧化还原酶1ERO1、Atf/CREB1同源蛋白HAC1、重连结合蛋白BIP、内质网到高尔基体的转运因子ERV29...
摘要 本发明公开一种重组蛋白酶与分子伴侣共表达制备酶的方法,将编码甲醛脱氢酶及甲醛氧化物歧化酶的重组质粒分别转化含分子伴侣共表达质粒的表达菌株,使蛋白酶与分子伴侣共表达,获得了蛋白酶的可溶重组表达(含组氨酸标签或不含组氨酸标签)。本发明将甲醛脱氢酶及甲醛氧化物歧化酶与组氨酸标签融合表达,可溶重组蛋白,经...
合成速率太快:可溶性蛋白的产率取决于蛋白的合成速率,蛋白的折叠速率,以及 聚集的速率。高水平表达时,肽链聚集的速率一旦超过折叠速率,就会形成包涵体。 氨基酸组成:含硫氨基酸越多越容易形成包涵体。 细胞内环境:还原性细胞质环境,pH接近目的蛋白的等电点,发酵温度高等。 缺乏正确的折叠机制:需要共表达分子伴侣。 #...
本发明涉及一种共表达分子伴侣蛋白生产α乳白蛋白的菌株及其应用,该菌株表达了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的人α乳白蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的αfactor信号肽和分子伴侣蛋白,分子伴侣蛋白选自内质网氧化还原酶1ERO1,Atf/CREB1同源蛋白HAC1,重连结合蛋白BIP,内质网到高尔基体的转运因子ERV29,毕赤酵母二硫...
本发明公开了一种共表达分子伴侣蛋白提高重组大肠杆菌中1,2,4丁三醇产量的方法,属于遗传工程领域.本发明是以重组大肠杆菌E.coli(pEtacmdlCtacxdh)作为出发菌株,通过共表达分子伴侣蛋白,辅助1,2,4丁三醇合成途径中关键酶的折叠,增强关键酶活性,从而提高1,2,4丁三醇产量的方法.最后优选分子伴侣Trigger factor,使...
分子伴侣共同表达目的 研究共同表达分子伴侣能否提高结核分枝杆菌编码基因的表达效率及被表达蛋白的生物活性.方法 将携带有结核分枝杆菌编码基因的表达质粒Rv3790::pET16b,Rv3791::pET16b与能够同时表达3个分子伴侣DnaK,DnaJ和GrpE的质粒pkJE7共同在大肠埃希菌BL21(DE3)表达,之后对所获得的蛋白通过聚丙烯酰胺凝胶电泳和...