1. 配制完全培养基 (DMEM基础培养基+10%FBS+1%双抗,不同细胞完全培养基不同,本实验以MDA-MB-231细胞为例); 2. 取复苏后培养24h后的细胞,在显微镜下观察细胞密度和生长状态,若细胞密度长至90%左右,可以传代; 3. 将细胞培养液倒入废液缸,沿着瓶身侧面加入少量的PBS,轻轻晃动瓶身使PBS充分接触细胞,冲洗后将...
细胞传代培养操作步骤如下:(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的胰蛋白酶,一般应覆盖整个培养瓶底。(4)把培养瓶放入37℃ CO2...
☑部分贴壁生长但贴壁不牢固的细胞可以采用直接吹打传代; ☑悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心沉淀后再分离传代,或直接用自然沉淀法吸除上清后,再吹打传代。 上次讲了细胞复苏操作,今天来讲讲细胞传代的操作(适用于贴壁细胞的传代培养)! 01、细胞传代前准备 ➡实验开始前,将15mL离心管、移液管、枪头等实验...
在细胞半溶后(不要等到全部溶解),迅速拿到生物安全柜或超净台中,用1ml的枪,抽出事先准备好的完全培养基打入冻存管中,然后抽到培养瓶中,反复进行,直至完全溶解。 把冻存管的细胞溶解后迅速离心 如果原代细胞溶解后马上离心,细胞所受的打击可能比DMSO的毒性还要大,不建议采用这个方法。用带有血清的完全培养基溶解...
一、实验材料 CO2培养箱、倒置显微镜、超净工作台、培养瓶、试管、移液管、巴斯德吸管、废液缸、75%酒精棉球、酒精灯、贴壁细胞株、完全培养基(RPML1640或DMEM),0.25%胰蛋白酶、PBS液。 二、操作步骤 (1)传代前准备 ①预热培养用液:把已经配制好的培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37 ℃水浴锅内预热。
细胞接毒实验操作步骤及注意事项。操作步骤: 1.准备细胞:选择适当的细胞系,培养并使其达到适当的生长状态。 2.准备病毒:根据你需要的病毒和浓度,制备好病毒溶液,如腺病毒、逆转录病毒等。 3.接毒:当细胞长到合适密度时,就可以进行接种(建议在细胞传代48h内进行接种,细胞密度达80-90%左右进行)。移除先前的培养...
上次讲了细胞复苏操作,今天来讲讲细胞传代的操作(适用于贴壁细胞的传代培养)! 01 细胞传代前准备 ➡ 实验开始前,将15mL离心管、移液管、枪头等实验需要用到的耗材放入无菌超净工作台,紫外线照射30min。 ➡ 将完全培养基、PBS、胰酶预热至37℃。