一.一步法原理 One step RT-PCR采用了一步反应法完成整个RT-PCR反应,即RNA-cDNA-qPCR反应操作在同一反应体系中进行,反应过程中不需增加额外的步骤,就可完成整个RT-PCR反应,具有方便、简捷、灵敏度高、重复性好的特点,可适用于各种动物、植物、病毒RNA的qPCR检测。 二.一步法的优点 1.简便操作 2.减少污染的可...
探针法 qPCR/RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´→3´ 核酸外切酶活性,将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光,并实时监测荧光值的增加,以测量每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置,可以确定循环数或 Cq值。Cq值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度,通过已知稀释浓度样品的标准曲线,可对靶...
一步法RT-qPCR(One-Step reverse transcription-quantitative PCR)用于以RNA为起始模板的定性和定量分析,将RNA逆转录合成cDNA的过程与靶标基因的PCR扩增于一管内依次进行,利用荧光来监控PCR扩增产物的变化,进而判断RNA初始量的技术即为一步法RT-qPCR技术。RT-qPCR根据化学发光原理可以分为两大类:一类为染料类,包括SYB...
基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性,将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光,并实时监测荧光值的增加,以测量每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置,可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度。 该预混液基于探针法化学原理,采用...
【RT-qPCR检测原理】 Magigen含UDG的RT-qPCR预混液整合了 Real Time RT-PCR 的反转录酶(MMLV Reverse Transciptase)、抗体修饰的热启动 DNA聚合酶(Hotstart Taq DNAPolymerase)和不耐热的 UDG酶,使用基因特异性引物(GSP)在单管中完成逆转录和 qPCR 反应,不需要额外的开管/移液操作,同时优化的缓冲体系中 dTTP ...
美格一步法RT-qPCR预混液使得一步完成新冠病毒等病原体检测与基因表达工作流程成为可能。【RT-qPCR检测原理】 本产品整合 Real Time RT-PCR 的反转录酶(MMLV Reverse Transciptase )和 抗体修饰的热启动酶( Hotstart Taq DNAPolymerase),配合经过优化的缓冲体系,使用基因特异性引物(GSP)在单管中完成逆转录和 ...
首先通过逆转录酶将总RNA或信使RNA(mRNA)转录成互补DNA(cDNA)。其次Taq DNA聚合酶以cDNA为模板进行qPCR扩增。RT-PCR已被广泛应用于多种分子生物学应用中,包括基因表达分析、基因测试、RNA干扰验证检测、微阵列验证、病原体检测和疾病研究。 RT-PCR的方法之一步法和两步...
【Magigen RT-qPCR用途】 用于以 RNA 为模板的探针法定量 PCR 检测,推荐检测模板为样本提取的核酸。美格化学修饰一步法RT-qPCR预混液使得安全快捷一步完成新冠病毒等病原体检测与基因表达工作流程成为可能。 【RT-qPCR检测原理】 Magigen化学修饰RT-qPCR预混液整合了 Real Time RT-PCR 的反转录酶和化学修饰的热...
qPCR Code No RR390A B Thermal Cycler Dice Real Time System II Code No TP900 TP960 Thermal Cycler Dice Real Time System Lite Code No TP700 TP760 NOTICE TO PURCHASER LIMITED LICENSE P7 PCR Notice P7 PCR Notice A license to perform the patented 5 Nuclease Process for research is obtained ...
检测原理: 探针法qPCR不使用荧光染料如SYBR Green等对PCR产物进行荧光染色,而是采用了荧光基团和淬灭基团(quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列(设计的探针结合位点通常位于两条引物结合位点之间)。正常情况下,探针上的淬灭基团由于空间上的荧光共振能力转移(FRET)而导致荧光基团淬灭。在PCR反应扩增目标序列...